人iPSCs分化成视网膜类器官的在体移植及生物力学研究

目录

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摘要

第1章绪论

1．1．视网膜与视网膜变性疾病

1．1．1．视网膜的基本结构

1．1．2．视网膜的生理过程及功能

1．1．3．视网膜变性疾病

1．2．干细胞和视网膜分化

1．2．1．视网膜胚胎发育概述

1．2．2．胚胎干细胞向视网膜细胞谱系方向分化的研究进展

1．2．3．诱导多能干细胞向视网膜细胞谱系方向分化的研究进展

1．2．4．干细胞移植治疗视网膜变性疾病

1．3．生物力学概述

1．3．1．力学信号的感受与传导

1．3．2．生物力学在视网膜中的研究进展

1．3．3．力学信号对细胞及组织活动的影响

第2章实验材料与方法

2．1．实验材料

2．1．1．实验动物与细胞

2．1．2．实验仪器

2．1．3．实验耗材

2．1．4． 主要试剂及抗体

2．1．5．主要细胞培养液配制

2．1．6．引物汇总

2．2．实验方法

2．2．1．人诱导多能干细胞的复苏与培养

2．2．2．人诱导多能干细胞向RPC分化

2．2．3．视网膜类器官的诱导分化

2．2．4．Gnat1-／-小鼠的在体细胞移植

2．2．5．类视网膜组织和视网膜类器官的RNA提取

2．2．6．RNA逆转录及实时荧光定量PCR(qPCR)

2．2．7．类视网膜组织的刚度测定

2．2．8．类视网膜组织的牵引力测定

2．2．9．免疫荧光染色(Immunohistochemistry，IHC)

2．2．10．数据分析

第3章实验结果与结论

3．1．BC1-eGFP细胞的贴壁培养及自组装分化

3．2．自发形成眼区并分化为类视网膜结构

3．3．诱导产生神经视网膜类器官

3．4．Gnat1-／-小鼠视网膜移植获得新生感光细胞(与谢浩寰合作)

3．5．人iPSCs向视网膜方向分化时形成环形结构

3．6．集落内外区域组织的刚度差异明显(与杨皓翔合作)

3．7．细胞力学影响集落内外区域组织的细胞分化(与杨皓翔合作)

3．8．参与力学调控集落分化过程的信号通路

第4章讨论与展望

参考文献

致谢

在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果