PGE2通过EP4/cAMP/PKA信号通路调控成纤维样滑膜细胞OAT1的表达及CP--25的作用

目录

声明

英文缩略词表 (Abbreviation)

1 前言

2 实验材料

2.1 药物和试剂

2.2 仪器和设备

2.3 实验动物

2.4 临床样本

3 实验方法

3.1大鼠胶原诱导型关节炎（CIA）模型的建立

3.2动物分组及给药方法

3.3 大鼠整体指标评价标准

3.4 大鼠关节和脾脏组织病理评分标准：

3.5 免疫组化法检测CIA大鼠滑膜组织中OAT1的表达

3.6 检测大鼠血清中PGE2的水平

3.7Western blot法检测OA与RA患者滑膜组织中OAT1的表达

3.8 PGE2对正常大鼠FLS 中OAT1胞膜表达的时间效应

3.9 CP-25对PGE2刺激的正常大鼠FLS中OAT1的胞膜和胞质表达的影响

3.10 EP4拮抗剂对CP-25调控的PGE2诱导的正常大鼠FLS中OAT1 的胞膜表达的影响

3.11 siRNA EP4对正常正常大鼠FLS中OAT1表达影响

3.12 PKA抑制剂对CP-25调控的PGE2诱导的正常大鼠FLS中OAT1的胞膜和胞质表达的影响

3.13 细胞膜红色荧光探针定位CP-25对FLS中OAT1的表达和分布的影响

3.14 数据分析

4 结果

4.1 CP-25对CIA大鼠整体指标的影响

4.2 各组大鼠血清中PGE2的水平

4.3 各组大鼠滑膜组织中OAT1的表达水平

4.4 OA与RA患者滑膜组织中OAT1的表达水平

4.5 PGE2对正常大鼠FLS中OAT1胞膜表达的影响

4.6 CP-25对PGE2刺激的正常大鼠FLS中OAT1的胞膜和胞质表达的影响

4.7 EP4拮抗剂对CP-25调控的PGE2诱导的正常大鼠FLS中OAT1 的胞膜表达的影响

4.8 siRNA EP4对正常大鼠FLS中OAT1表达影响

4.9 PKA抑制剂对CP-25调控的PGE2诱导的正常大鼠FLS中OAT1的胞膜胞质表达的影响

4.10 CP-25对滑膜细胞中OAT1的表达和分布的影响

5 讨论

5.1 CP-25对CIA大鼠滑膜组织中异常表达的OAT1的作用

5.2 CP-25通过活化PGE2介导的信号通路影响OAT1在大鼠FLS中胞膜和胞质的表达

6 结论

参考文献

附录

致谢

综述:炎症状态下的细胞中药物转运体研究进展