bFGF复合HSPG载体促进种植体周围骨缺损修复的研究

摘要

目的:如何促进种植体周围骨缺损的修复是临床上关注的热点，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在骨及软骨形成修复过程中具有重要的作用，但其生物学特性很不稳定，体内半衰期短，易受热、酶、酸等环境的影响而降解。硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)是bFGF的受体之一，在细胞外基质分子中广泛存在，作为一种稳定基质结构和细胞-基质相互作用的粘合剂，它介导了生长因子信号对细胞增生和分化的作用。本研究设计采用HSPG作为bFGF的载体，植入种植体周围骨缺损区，初步探讨bFGF/HSPG复合物持续释放骨生长因子bFGF对种植体周骨缺损区域的骨整合影响，为临床应用奠定理论基础。
　　 方法:雄性SD大鼠20只，2～3月龄，体重300±20g，SPF级环境中饲养，随机分配到空白对照组、bFGF组、HSPG组、bFGF/HSPG组四组中，在标准化种植导板的辅助下，用组合钻钻至种植体所需的深度和直径，将种植钉植入，并在种植体周围的骨缺损区放入不同的处理方法。3月后取材，Micro-CT扫描观察种植体周围骨组织的骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间隙(Tb.Sp)，扫描电镜观察种植体与骨结合的表面超微结构形态，HE染色法观察种植体周围骨缺损区骨小梁的再生情况。所有数据采用SPSS17.0处理，P＜0.05为差异具有统计学意义。不同组之间的数据采用单因素方差分析。
　　 结果:
　　 ①bFGF/HSPG组的骨体积分数、骨小梁的厚度、骨小梁的数量、骨小梁间隙的统计结果均优于bFGF组和HSPG组，bFGF组和HSPG组二组之间的数据无统计学意义，bFGF组和HSPG组相对空白组有统计学意义。
　　 ②三维重建的模型看出骨内段的上三分之一骨愈合情况良好，各组骨小梁数目无明显差别，Micro-CT扫描结果示HSPG+bFGF组骨小梁厚度增强，骨小梁间隙少于bFGF组及HSPG组，有统计学意义。bFGF组及HSPG组之间骨小梁间隙无差别，但均优于空白对照组。骨内段的下三分之二的骨愈合情况出现明显差异，HSPG+bFGF组骨小梁数目及骨小梁厚度均明显优于bFGF组及HSPG组，bFGF组及HSPG组之间骨小梁数目及骨小梁间隙无差别，空白对照组骨下三分之一的骨小梁数目及密度都很少，bFGF组及HSPG组在骨下三分之二的骨生长比较稀疏，而HSPG+bFGF组在整个骨内段均生长良好，大量的骨小梁，且呈现出比较致密的状态，连根尖部分都有很好的骨生长。
　　 ③种植体骨外段部分，HSPG+bFGF组中我们观察到了圆弧型的骨皮质的结构，它从胫骨原来的骨皮质部分呈拱桥状的生长到了种植钉表面，结合非常紧密，更直观的提示了bFGF+HSPG对连接种植钉和骨起到了非常良好的作用。
　　 ④种植体骨硬组织切片（纵切面）通过扫描电镜观察出种植体和骨达到了良好的骨愈合，在放大到200倍的情况下，种植体和骨之间显示出良好的骨愈合，可以说是达到了无缝连接。在骨界面上，较多的骨陷窝提示骨细胞的数目较多，说明骨愈合过程非常好。
　　 ⑤组织学观察反映出HSPG+bFGF组的骨生长状态均优于其余各组。
　　 结论:
　　 ①bFGF复合HSPG载体对促进种植体周围骨缺损的修复明显优于bFGF或HSPG的单独使用。
　　 ②bFGF或HSPG单独使用时比空白对照组对种植体周围骨缺损的修复有明显优势，但bFGF和HSPG二组之间的差异不大，无统计学意义。
　　 ③bFGF和HSPG互为配体受体的关系促进了bFGF的生物学活性，但二者之间在种植体骨缺损中更为精确的分子机制尚需迸一步研究。
　　 ④Micro-CT可以快速准确的分析出种植体周围骨组织的微观数据结构。

目录

摘要

引言

缩略词表

第一章 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

第二章 结果

2．1 术后大体观察

2．2 实验动物取材

2．3 Micro-CT检测结果

2．4 大体标本电镜观察种植体表面超微结构形态

2．5 种植体硬组织切片机切片后扫描电镜观察

2．6 HE染色

第三章 分析与讨论

全文小结

参考文献

附录

致谢

硫酸乙酰肝素HSPG在骨缺损修复中的研究(综述)

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