出生后早期接触低剂量速灭威对小鼠神经发育的影响

摘要

背景：　　　　速灭威(MTMC)是一种常用的氨基甲酸酯类农药。急性接触高剂量氨基甲酸酯类农药(Carbamates Pesticides CMs)可通过抑制胆碱酯酶活性而产生神经毒性作用，长期接触一定剂量的CMs也可以产生慢性毒作用。但是目前尚不清楚MTMC是否具有的神经发育毒性。 目的： 于出生后海马发育的关键期，用低剂量MTMC经腹腔注射为小鼠染毒，观察其神经发育有无异常，并探讨其可能的作用机制。 方法： 仔鼠于出生后第三天开始腹腔注射MTMC(0.05、0.5、5 mg/kg)，隔天一次，染毒六次，每次染毒前称重以确定染毒体积(2μl/g)，使用一组发育神经行为毒性试验来测量MTMC对仔鼠生理发育、躯体感觉运动及运动协调能力的影响。运用洞板实验(PND 45)观察小鼠生活习性变化，平衡木和抓绳实验(PND 70)观察运动协调能力，黑白巷实验(PND 50)观察焦虑状况，旷场试验(PND 60)评价小鼠自主活动能力及焦虑状况，Morris水迷宫(PND 120)检测小鼠染MTMC后学习记忆能力。 末次给药(PND 13)后24 h，每组剖杀10只小鼠(雌雄各半)，测定血胆碱酯酶活力，观察MTMC对体内胆碱酯酶活力的影响：成年小鼠(PND 127)剖杀后测定大脑皮层突触生长相关蛋白-43(GAP-43)的表达，以观察大脑神经突触蛋白表达。 统计学处理：SPSS10.0 for windows软件包建立数据库并进行统计分析 4.结果小鼠出生后早期有限次数(6次)经腹腔注射接触低剂量MTMC(最高剂量不抑制全血胆碱酯酶活力)，观察MTMC对神经发育的影响，结果发现： (1)各组小鼠毛色光洁度、活力、步态、分泌物、眼外观、呼吸、神态等无异常表现。小鼠体重增长在组间差异无显著性。 (2)各MTMC组小鼠开眼达标时间均延迟(p<0.01)，5mg/kg MTMC组小鼠下牙萌出达标时间延迟(p<0.05)，而其他早期生理发育指标(上牙萌出、睾丸下降、阴道开启等)均正常达标。 (3)各MTMC组小鼠的前肢悬挂、平面翻正、负趋地性行为学指标达标时间正常，但悬崖回避达标时间均延迟(p<0.05)，且存在剂量一反应关系(r=0.98，p<0.05)；至青年期，在同样反映躯体感觉运动功能的平衡木和抓绳测试中，各组小鼠得分差异无统计学意义。反映自主活动的指标(洞板上的观洞次数、旷场实验中潜伏期、跨越格子数)和反映焦虑情绪的指标(旷场实验中站立次数、大便颗粒数和捋毛次数及黑白巷潜伏期)在各组间差异均无统计学意义。 (4)各MTMC组小鼠在Morris定位航行实验中的登台潜伏期、在Morris空间探索实验中60 s内的游泳总路程均无统计学差异；但在空间探索实验中，小鼠在原平台象限游泳的时间及60 s内穿越原隐匿平台位置的次数，随MTMC染毒剂量的增加而逐渐减少(r分别为-0.98和-0.99，皆p<0.05)，至5mg/kg组有统计学意义(P<0.05)。 (5)5mg/kg及0.5mg/kg MTMC组小鼠大脑皮层GAP-43蛋白含量升高(p<0.01)，且存在剂量依赖性(r=0.91，p<0.05)。 结论： 出生后早期接触低剂量MTMC，对仔鼠躯体感觉运动功能发育的影响至青年期可恢复；虽不引起大脑大体形态的改变，但小鼠成年后的空间记忆能力下降，且大脑皮层突触蛋白GAP-43增加。

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

1前言

2.材料与方法

3结果

3.1小鼠一般发育情况

3.2MTMC对小鼠早期生理发育的影响

3.3MTMC对小鼠神经行为发育的影响

3.4出生后早期接触MTMC对小鼠成年后神经行为学的影响

3.5小鼠血AchE和BuChE含量

3.6 对成年后小鼠脑形态大体发育的影响

3.6 对成年后小鼠大脑皮层GAP-43表达的影响

4讨论

4.1MTMC对脑组织胆碱酯酶活性的影响

4.2MTMC对小鼠生理发育和断乳前神经行为发育的影响

4.3对成年鼠感觉运动能力的影响

4.4自主活动与焦虑状况的影响

4.5对学习记忆的影响

4.6对大脑皮层GAP-43的影响

5结论

参考文献

小结

个人简历

致谢

综述:胆碱酯酶抑制类农药的神经毒性研究新进展