PLGA仿生矿化及其对大鼠BMSCs粘附增殖和成骨分化影响的实验研究

摘要

第一部分可降解生物材料PLGA仿生矿化的实验研究 目的：通过对PLGA的仿生矿化表面改性，以提高其生物学活性；探讨影响仿生矿化的因素和条件，检测矿化过程对PLGA支架材料孔隙率及生物力学强度的影响，为进一步制备组织工程化人工骨提供依据和实验基础。 方法：PLGA膜经碱性溶液水解处理后，应用高温显微镜测量材料表面润湿角的变化；碱处理后的PLGA膜和三维多孔PLGA分别在0.5倍SBF中矿化20天，在SBF中矿化14天，在1.5倍SBF中矿化9天，应用扫描电镜进行矿化物形貌观察，X射线能谱分析钙磷比值，X射线衍射仪和傅立叶转换红外光谱仪行矿化物物相分析，比重法测量矿化前后材料孔隙率的变化，津岛生物力学测试仪测试材料矿化前后抗压强度的变化。 结论：PLGA仿生矿化是制备结构及性质类似骨基质人工骨的可行方法。 第二部分大鼠BMSCs的培养和鉴定 目的：大鼠BMSCs的体外获取并鉴定，为进一步行材料生物学性能的检测提供细胞来源。 方法：取幼年SD大鼠骨髓，分离骨髓间充质干细胞，观察细胞形态特征、生长状况，从表面抗原表达及生物学行为两个方面进行鉴定。 结论：分离培养的细胞成分单一，鉴定为BMSCs，可以应用于材料生物学性能的检测。 第三部分PLGA仿生矿化对大鼠BMSCs粘附增殖和成骨分化的影响 目的：通过检测大鼠BMSCs在仿生矿化后PLGA表面粘附、增殖和成骨分化的行为，进一步了解仿生矿化改性对PLGA生物学性能的影响，为进一步构建仿生矿化人工骨提供实验依据。 方法：将培养的大鼠BMSCs分别接种于未矿化的PLGA和矿化后的PLGA上，同时以煅烧松质骨材料为对照，以间接计数法测定细胞接种24小时后的细胞粘附率；通过细胞DNA荧光定量检测法测定细胞在各组材料上增殖的情况，并绘制细胞增殖曲线；应用RT-PCR的方法测定各组材料上大鼠BMSCs成骨基因表达情况，通过比较成骨基因表达时间先后次序和量的变化，表明各组材料对BMSCs向成骨细胞分化的影响。 结论：PLGA经过仿生矿化表面改性后，能够显著提高材料促进大鼠BMSCs粘附、增殖以及成骨分化的能力。

目录

缩写词表

摘要

前言

第一部分可降解生物材料PLGA仿生矿化的实验研究

第二部分大鼠BMSCs的分离培养及生物学鉴定

第三部分PLGA仿生矿化对大鼠BMSCs粘附增殖和成骨分化的影响

小结

附图及附表

综述一骨组织工程材料的表面仿生矿化

综述二：异种煅烧骨材料的研究进展

附录

致谢