三类杀微生物剂候选物及中药复方三黄散体外抗HIV-1活性的初步评价

摘要

为了寻找新型的预防性传播疾病的制剂，本文采用了合胞体形成抑制实验法、MTT比色法和p24ELISA检测法，对未酯化多糖、硫酸酯化多糖和稀土化合物中的某些种类进行了研究。合胞体形成抑制实验是通过计数合胞体测定样品的抗HIV-1活性，因为HIV-1ⅢB(X4株)可以诱导C8166细胞形成合胞体，有效的样品可以抑制X4型病毒引起的这种病变，抑制合胞体的形成，并且在一定范围内皇现量效关系。本文选择了p24ELISA实验法检测样品抗HIV-1Ada-M(R5株)的活性，这种方法能够客观的反映细胞培养上清中HIV-1p24的含量，从而确定化合物对p24抗原表达的抑制作用。通过MTT比色法研究了所有样品的毒性，其原理是活细胞内的线粒体脱氢酶可将黄色的MTT还原成蓝紫色的晶体甲簪(formazan)，蓝紫色甲簪的形成与活细胞数目成比例。通过时间过程实验，初步确定化合物的作用靶点；还通过细胞融合实验测定样品对细胞融合的抑制作用，通过把未感染的C8166细胞与慢性感染的H9/HIV-1ⅢB细胞以3：1的比例共培养，同时加入梯度浓度的待测化合物。观察化合物能否抑制未感染细胞与慢性感染细胞的融合。在此基础上，由疱疹病毒感染细胞的保护实验研究了部分化合物对Ⅱ型疱疹病毒的抑制活性。另外，还应用上述方法检测了治疗用中药复方三黄散胶囊体外抗HIV-1的活性。 所研究的化合物中Q1、DN1、Q4-1、Q4-2、728A、728B、728C、728C-1、728D、728E、728F、821A、821D、821E、LN43和LN43-2均显示了较高的抗HIV-1活性，其中821A、Q4-1、Q4-2、821D和821E具有抑制疱疹病毒的活性，作为杀微生物剂的候选化合物具有良好的开发前景，值得进一步研究。治疗用中药复方三黄散胶囊在抑制病毒方面也有一定作用，与前期临床试验结果基本上相吻合。

目录

文摘

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第一部分综述部分第一章艾滋病毒研究进展

1.1 AIDS的流行概况及开发抗HIV病毒药物的必要性

1.2艾滋病毒的基本知识

第一部分综述部分第二章抗艾滋病毒药物研究进展

2.1抗艾滋病毒药物作用靶点

2.2艾滋病药物的发展历程和FDA已批准上市的药物

2.3预防艾滋病性传播的杀微生物剂的研究进展

第一部分综述部分第三章几种体外初步评价化合物抗HIV活性的技术简介

3.1对活性物质的筛选

3.2确定抗HIV化合物作用靶点的研究方法

第二部分实验部分第一章三类杀微生物剂候选物抗HIV活性及机理的初步研究

1.1引言

1.2实验材料

1.3实验方法

1.4实验结果

1.4.1未酯化多糖对HIV-1的抑制作用

1.4.2硫酸酯化多糖对HIV-1的抑制作用

1.4.3稀土化合物对HIV-1的抑制作用

1.5讨论

第二部分实验部分第二章 中药复方三黄散胶囊体外抗艾滋病毒的活性研究

2.1引言

2.2实验材料

2.3实验方法

2.4实验结果

2.4.1复方三黄散胶囊体外对细胞的毒性作用

2.4.2复方三黄散胶囊体外对HIV-1ⅢB的抑制作用

2.5讨论

参考文献

致谢