辣木组织培养繁殖技术研究

摘要

辣木(Moringa oleifera Lam)，又称鼓槌树(Drumstick tree)，原产于印度及非洲，为辣木科(Moringaceae)辣木属(Moringa Adams)多年生速生乔木。辣木经济价值高，是一种多功能的经济树种。繁殖方式主要是种播和扦插，扦插要建立优良的采穗圃，引种初期还不具备这样的条件，因此主要选择种子繁殖。云南省主要从印度、台湾和海南引进种子，但仅仅依靠引进种子价格太高，不能满足大面积发展辣木产业的需要，开展辣木组织培养繁殖技术研究，有助于解决引种初期所面临的良种缺乏问题，更有助于以后进一步开发辣木优质种质资源。 本研究采用植物组织培养的原理与方法，探索辣木离体快繁的有效途径，以辣木种子为外植体培养无菌苗，诱导无菌苗的茎段产生不定芽，继而增殖生根，炼苗移栽。试验用方差分析法进行数据统计分析，筛选出辣木种子适宜的消毒方法，不定芽诱导，继代和生根培养基的配方及培养程序。主要研究结果如下： 1．辣木种子适宜的消毒步骤是：15％H<,2>O<,2>浸种6～8h——→清水轻轻洗干净——→0.1％HgCl<,2>(吐温1～2滴)消毒25min——→无菌水冲洗4～5次，每次5min——→剥壳接种，培养在MS+3％蔗糖+琼脂6g/L上，10d后种子萌发率可达79％。 2．诱导不定芽以MS为基本培养基，NAA、6-BA和KT三种激素，单独使用和配合使用，均能诱导不定芽产生。不定芽诱导的适宜培养基为：MS+6-BA0.8mg/L+3％蔗糖+琼脂6g/L和MS+6-BA0.1mg/L+KT0.5mg/L+3％蔗糖+琼脂6g/L，诱导率达100％，形成不定芽所需时间短，丛生芽数量多，质量高。 3．继代培养时，对大量元素和蔗糖浓度进行试验，结果以MS培养基中所含的大量元素和3％蔗糖浓度效果最好。2-3周继代一次，增殖倍数达6。细胞分裂素为6-BA0.5mg/L时，在NAA、IBA和IAA三种细胞生长素中，以NAA最为适宜，0.02mg/L就能促进无菌苗茎的伸长；诱导增殖的细胞分裂素6-BA和KT，以6-BA更好，浓度在1.0mg/L时，配合0.05mg/L细胞生长素NAA，植株生长健壮，培养15d左右，增殖系数一般可达5，若接种母体生长粗壮，增殖系数还会提高。6-BA和NAA配合使用时，6-BA0.3-0.9mg/L+NAA0.01-0.1mg/L均能达到较好的增殖效果，增殖倍数都在3倍以上。但最适宜的继代培养基配方是MS+6.BA0.6mg/L+NAA0.1mg/L+3％蔗糖+琼脂6g/L，增殖倍数达5.9。 4．在生根培养阶段，本试验以1/2MS为基本培养基，附加不同浓度不同种类的激素以诱导生根，结果表明：在各种生长素不同浓度处理中，以IBA诱导的，根数量多，0.1mg/L时根的诱导率达到98％；1/2MS+IBA0.1mg/L+蔗糖15g/L+琼脂6g/L是辣木生根的最适宜的培养基，10d开始生根，平均根数在4根以上，平均根长2cm左右。生根前期温度不宜太高，否则导致辣木徒长，影响移栽成活率。 5．炼苗移栽时，辣木较适宜的炼苗天数为7d。移栽基质采用土沙混合(土:沙=1:3体积比)或营养土和珍珠岩(2:1体积比)混合，无污染且生根好的小苗，30d后成活率仍在80％以上。营养土和珍珠岩的配比，在生长后期，能为幼苗提供丰富的营养元素，使移栽苗生长健壮。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词目录(List of Abbreviation)

声明

1绪论

1.1辣木的研究现状

1.2辣木的引种栽培和繁育研究进展

1.3植物组织培养的概念、原理

1.4辣木组织培养在林木遗传育种中的作用

1.5辣木组织培养的目的意义

2材料与方法

2.1试验材料

2.2试验方法

2.2.1培养条件

2.2.2初代培养

2.2.3不定芽诱导

2.2.4继代培养

2.2.5生根培养

2.2.6炼苗移栽

2.3试验结果观测及统计方法

2.3.1初代培养

2.3.2不定芽诱导

2.3.3继代培养

2.3.4生根培养

2.3.5炼苗移栽

2.3.6数据统计分析

3结果与分析

3.1初代培养

3.1.1不同的消毒剂对辣木种子消毒的影响

3.1.2消毒时间的探索

3.2不定芽诱导

3.2.1植物生长调节剂对辣木茎段的诱导

3.2.2植物生长调节剂配比对辣木(茎段)诱导分化

3.3继代培养

3.3.1大量元素对辣木繁殖系数的影响

3.3.2碳浓度对辣木增殖系数及嫩茎长度的影响

3.3.3植物生长调节剂对辣木继代增殖的影响

3.3.4 NAA和6-BA配合对辣木增殖倍数及嫩茎长度的影响

3.3.5转接周期对辣木增殖的影响

3.4生根诱导

3.4.1生长调节剂对辣木苗生根的影响

3.4.2不同种类的生长素配比对生根的影响

3.5移栽炼苗

3.5.1炼苗不同天数对成活率的影响

3.5.2不同移栽基质对辣木移栽成活率的影响

4结论

4.1基本培养基的选择

4.2初代培养

4.3不定芽的诱导

4.4辣木的继代繁殖

4.5试管苗的生根

4.6炼苗移栽

4.7移栽基质对辣木成活率的影响

4.8辣木组织培养及试管苗诱导程序

5讨论与建议

5.1初代培养

5.1.1消毒剂的选择与外植体的消毒

5.1.2污染产生原因及防止

5.1.3不定芽分化的研究

5.2继代培养

5.2.1基本培养基的影响

5.2.2植物激素的影响

5.2.3接种材料对辣木增殖的影响

5.3畸形、异形苗产生原因及解决方法

5.4生根的影响因子

5.5瓶苗的移栽

5.6对本研究工作下一步的建议

参考文献

致谢

附录