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【6h】

邻苯二甲酸单乙基己基酯对HepG2细胞胆固醇代谢的影响

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前言

1 材料与方法

1.1 细胞株

1.2 主要仪器与试剂

1.2.1 仪器

1.2.2 试剂

1.2.3 主要试剂的配制

1.3 细胞的复苏、培养、传代及冻存

1.3.1 细胞的复苏

1.3.2 细胞的培养

1.3.3 细胞的传代

1.3.4 细胞的冻存

1.4 实验分组及染毒

1.5 实验方法

1.5.1 化学酶法检测HepG2细胞胞内及上清中TC和FC的含量测定

1.5.2 qRT-PCR法检测HepG2细胞胆固醇代谢相关基因的表达水平

1.5.3 免疫细胞化学法检测HepG2细胞核内nSREBP-2蛋白表达情况

1.5.4 蛋白杂交法检测HepG2细胞胆固醇代谢相关蛋白的表达水平

1.6 数据分析

2 结 果

2.1 MEHP对HepG2细胞胆固醇含量的影响

2.1.1 MEHP对HepG2细胞总胆固醇含量的影响

2.1.2 MEHP对HepG2细胞游离胆固醇含量的影响

2.2 MEHP对HepG2细胞胆固醇代谢相关基因的影响

2.2.1 MEHP对HepG2细胞游离胆固醇合成相关基因Insig-1、SCAP、SREBP-2及HMGCR的影响

2.2.2 MEHP对HepG2细胞内胆固醇酯化相关基因ACAT1表达水平的影响

2.2.3 MEHP对HepG2细胞内胆固醇重摄取相关基因LDLR表达水平的影响

2.3 MEHP对HepG2细胞核内nSREBP-2蛋白表达水平的影响

2.4 MEHP对HepG2细胞内SREBP-2、HMGCR、ACAT1及LDLR蛋白表达的影响

3 讨 论

3.1 MEHP对HepG2细胞胆固醇含量的影响

3.2 MEHP对HepG2细胞胆固醇代谢影响的可能机制

4 结 论

参考文献

综述:人3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶的研究意义

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