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【6h】

天然九里香丙素靶向抑制TRPV2通道的药理学确证与作用机制研究

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目录

引言

实验材料与方法

1 实验试剂

2 实验仪器

3 实验步骤

3.1香豆素衍生物的提取和分离

3.2 质粒的转化与提取

3.3 细胞培养与质粒瞬时转染

3.4 FlexStation 3 Ca2+内流检测

3.5 钙成像实验

3.6 全细胞膜片钳实验

3.7 实时荧光定量PCR

3.8 Western Blot

3.9 褐色脂肪细胞原代培养与油红染色

3.10 分子对接和定点突变

4 统计学处理

结果

1 两种香豆素对映体B304-1和B304-2的手性分离和结构测定

2 对应异构体B304-1和B304-2抑制TRPV2通道的活性评价

2.1 利用钙成像技术和Flexstation技术评价B304-1和B304-2对TRPV2通道的抑制作用

2.2 B304-1和B304-2剂量依赖性抑制TRPV2通道

3 B304-1和B304-2选择性抑制TRPV2通道

3.1 B304-1和B304-2对TRPV亚家族其他成员选择性

3.2 B304-1和B304-2对其它通道选择性

4 B304-1和B304-2抑制褐色脂肪细胞中内源性TRPV2通道

4.1 TRPV2通道在褐色脂肪细胞中高表达

4.2 B304-1和B304-2抑制褐色脂肪中内源性TRPV2样电流

5 九里香丙素逆转TRPV2激动剂引起的褐色脂肪细胞分化降低

6 九里香丙素的SAR表明抑制TRPV2需要2'-OH基团

7 分子对接预测B304-1和B304-2与TRPV2的结合位点

讨论

结论

论文的创新点和不足

参考文献

综述:热敏型TRP通道在褐色脂肪组织中的作用

综述参考文献

攻读学位期间的研究成果

缩略词表

附录

致谢

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