第一章 绪 论
1 秀丽隐杆线虫
2苏云金芽胞杆菌杀虫活性的研究
3 秀丽隐杆线虫免疫应答调控系统
3.1 MAPK信号转导通路
3.2 胰岛素样信号通路
3.3 TGF-β信号转导通路
4 线虫对Bt晶体蛋白毒素免疫应激反应
5 立题依据及意义
第二章材料与方法
1材料
1.1供试菌株
1.2秀丽隐杆线虫
1.3 载体
1.4 培养基
1.5 抗体
1.6 PCR引物合成
1.7 试剂盒和相关试剂
1.8 主要仪器设备
2实验方法
2.1 Cry6A毒素对秀丽隐杆线虫PMK-1/2磷酸化水平的影响
2.2 PMK-2蛋白的可溶性检测
2.3 ttm-2突变体构建
2.4 Cry6A，Cry5B对ttm-1，ttm-2突变体的毒力敏感测定
2.5 Cry6A对野生型秀丽隐杆线虫的转录组测序分析
第三章结果与分析
1 Cry6A晶体蛋白毒素对秀丽隐杆线虫突变体PMK-1/2磷酸化水平的影响
1.1 Cry6A, Cry5B晶体蛋白的提取纯化
1.2 sek-1和nsy-1是PMK-2上游激酶
2 PMK-2蛋白的可溶性检测
2.1PMK-2蛋白诱导表达
2.2 PMK-2蛋白的可溶性鉴定
3秀丽隐杆线虫ttm-2基因的RNA干扰
3.1秀丽隐杆线虫总RNA的提取
3.2 ttm-2基因的RNA干扰载体的构建
3.3 ttm-2重组菌株喂食线虫
3.3 ttm-2基因干扰效果
4 Cry6A，Cry5B晶体蛋白对野生型N2及ttm-1，ttm-2突变体的毒力作用
5 Cry6A毒素处理野生型秀丽隐杆线虫RNA-seq数据分析
5.1 Cry6A蛋白的诱导表达
5.2 Cry6A对秀丽隐杆线虫生长情况的影响
5.3 秀丽隐杆线虫总RNA的提取与质量检测
5.4秀丽隐杆线虫转录组测序质量检测
5.5 秀丽隐杆线虫转录组测序差异基因表达分析
5.6 秀丽隐杆线虫在Cry6A毒素处理下差异表达基因GO分类
5.7秀丽隐杆线虫在毒素处理条件下的KEGG pathway分析
5.8 差异基因的功能分析
6利用qRT-PCR技术检测差异基因在转录水平上的差异
6.1 pmk-2基因干扰效果检测
6.2 利用qRT-PCR检测处理和对照组秀丽隐杆线虫中11种差异基因转录情况
6.3 Cry6A使秀丽隐杆线虫ATP含量上升
6.4 Cry6A对秀丽隐杆线虫突变体的毒力作用
第四章 讨论
1 Cry6A对秀丽隐杆线虫的作用
2 MAPK下游调控多种能量相关蛋白
3 秀丽小杆线虫能量代谢分析
第五章 结 论
1 PMK-2与PMK-1共用上游激酶SEK-1和NSY-1
2 PMK-2不与PMK-1共用下游靶标TTM-1和TTM-2
3 通过RNA-seq确定了一些与秀丽隐杆线虫防御Cry6Aa2毒素相关的途径和蛋白
参考文献
论文发表情况
课题受资助的基金项目
致谢
