声明
英文缩略词表 (Abbreviation)
1 前言
2 实验材料和仪器
2.1 动物
2.2 药物
2.3 试剂
2.4 溶液配制
2.5仪器与设备
3 实验方法
3.1 大鼠胶原性(CIA)模型的建立
3.2 实验动物分组及给药方法
3.3 大鼠整体指标评价
3.3.1 大鼠全身表现评分
3.3.2 关节肿胀数和关节炎指数评分
3.4 胸腺指数和脾脏指数测定
3.5 胸腺T和脾脏B细胞增殖反应检测
3.6 脾脏和踝关节病理组织学检查
3.7 流式细胞术检测不同炎症时期外周血中T细胞亚群百分比的变化
3.8 流式细胞术检测大鼠脾脏细胞中T细胞亚群百分比的变化
3.9 酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和蛋白芯片技术检测大鼠血清中炎症因子的水平
3.10 Western blot法检测脾脏细胞中Lck、p-Lck、ZAP70、p-ZAP70、P38、p-P38、NF-κB65和 p-NF-κB65蛋白表达
3.10.1 大鼠脾脏组织蛋白提取
3.10.2 蛋白质样本的定量(BCA法)
3.10.3 Western blot的方法步骤
3.11 CCK-8检测IgD对T细胞增殖的影响及IgD-Fc-Ig融合蛋白的作用
3.12 流式细胞术检测IgD刺激的脾脏细胞中T细胞亚群百分比及IgD-Fc-Ig融合蛋白的作用
3.13 Western blot法检测IgD刺激的脾脏细胞中Lck、p-Lck、ZAP70、p-ZAP70、P38、p-P38、NF-κB65和 p-NF-κB65蛋白表达及IgD-Fc-Ig融合蛋白的作用
3.14 统计学分析
4 结果
4.1 IgD-Fc-Ig融合蛋白对大鼠CIA有治疗作用
4.2 IgD-Fc-Ig融合蛋白降低CIA大鼠胸腺指数和脾脏指数
4.3 IgD-Fc-Ig融合蛋白抑制CIA大鼠T/B细胞增殖的影响
4.4 IgD-Fc-Ig融合蛋白改善CIA大鼠脾脏和关节组织病理变化
4.5 IgD-Fc-Ig融合蛋白对CIA大鼠不同炎症时期外周血中T细胞亚群百分比的影响
4.6 IgD-Fc-Ig融合蛋白调控CIA大鼠T细胞的分化和活化
4.7 IgD-Fc-Ig融合蛋白对CIA大鼠血清中炎症因子水平的影响
4.8 IgD-Fc-Ig融合蛋白下调CIA大鼠脾脏细胞中p-Lck、p-ZAP70、p-P38和p-NF-κB65蛋白表达
4.9 IgD对T细胞功能的作用及IgD-Fc-Ig融合蛋白的影响
4.9.1 不同浓度的IgD对T细胞增殖的影响
4.9.2 IgD-Fc-Ig融合蛋白抑制IgD刺激的T细胞的增殖
4.9.3 IgD-Fc-Ig融合蛋白单独作用对T细胞无增殖作用
4.10 IgD-Fc-Ig融合蛋白调控IgD刺激的脾脏细胞中T细胞的活化和分化
4.11 IgD-Fc-Ig融合蛋白下调IgD刺激的脾脏细胞中p-Lck、p-ZAP70、p-P38和p-NF-κB65蛋白表达
5 讨论
5.1 IgD可能促进T细胞的增殖、活化和分化参与RA的病理机制
5.2 IgD-Fc-Ig融合蛋白对CIA大鼠的治疗作用
5.3 IgD-Fc-Ig融合蛋白通过抑制T细胞的活化和分化来调控T细胞功能
5.4 IgD-Fc-Ig融合蛋白通过调控细胞功能来抑制炎症因子的分泌
5.5 IgD-Fc-Ig融合蛋白通过调控IgD-IgDR-Lck-NF-κB信号通路发挥作用
6 结论
参考文献
附录
致谢
综述:胶原三螺旋重复蛋白-1参与疾病作用研究进展
