过氧乙酸对鲍曼不动杆菌消毒灭菌作用的实验研究

摘要

观察消毒剂过氧乙酸(PAA)对鲍曼不动杆菌(A．baumannii)消毒后的活菌培养计数，探讨该消毒剂对A．baumannii的杀菌效果，同时过氧乙酸可能的杀菌机制。 材料和方法:采用实验室贮存的鲍曼不动杆菌，将其制成菌悬液，先用细菌浓度比浊测定法粗测其含菌浓度，然后以稀释液稀释至1×108 cfu／ml～5×108cfu／ml。3％牛血清白蛋白组54株鲍曼不动杆菌，0.3％牛血清白蛋白组8株鲍曼不动杆菌。采用二元包装过氧乙酸溶液，A液和B液以10：8(体积比)混匀，密闭放置24小时、48小时、72小时分别用碘量法测定其浓度，用无菌硬水配制过氧乙酸稀溶液。参照消毒技术规范进行中和剂鉴定实验，选择3g/l硫代硫酸钠+10g/l吐温-80作为中和剂。取消毒试验用试管，先加入0.5ml鲍曼不动杆菌悬液，再加入0.5ml有机干扰物(0.3％牛血清白蛋白，3％4牛血清白蛋白)，置20℃±1℃水浴中5min后，用无菌吸管吸取过氧乙酸4.0ml注入其中，迅速混匀并立即计时，待作用至预定时间，用数字可调移液器吸取0.5ml上述混合液加入4.5ml经灭菌的中和剂中，混匀作用10min后，吸取1.0ml样液加于无菌培养皿中(每管样液接种2个培养皿)，将冷至40℃～45℃的胰蛋白胨大豆琼脂培养基15ml倾注于已加入样液的培养皿中。待琼脂凝固后，置37℃的温箱内培养48小时，计数菌落数。试验分为3个过氧乙酸浓度组：0.005％(50mg/l)，0.01％(100mg／l)，0.02％(200mg/l)以及5个作用时间(1min，3min，5min，15min，30min)。同时设立对照组：用稀释液代替消毒液，进行平行试验，作为阳性对照，所得结果代表菌液原有浓度，以作为计算杀灭对数的初始浓度。试验均重复3次，计算各组的活菌浓度(cfu/ml)。结果1、过氧乙酸的含量：过氧乙酸A液和B液以10：8(体积比)混匀，密闭放置24小时、48小时、72小时后其含量分别为182g/l、194g/l、188g/l。 2、中和剂鉴定试验：采用0.02％过氧乙酸和3％牛血清白蛋白，中和剂3g／l硫代硫酸钠+10g/l吐温-80，第1组无细菌，第2组菌落数158 cfu／ml，第3组菌落数56625000 cfu／ml，第4组菌落数57292000 cfu／ml，第5组菌落数60080000 cfu／ml，第6组无菌生长，第3、4、5组的组间菌落数误差率为2.4％。 3、3％牛血清白蛋白作为有机干扰物的各试验组的比较：三种浓度过氧乙酸杀菌效果有显著差异(P<0.01)；0.005％过氧乙酸与0.01％过氧乙酸杀菌效果比较：0.01％过氧乙酸明显增高(P<0.01)；0.005％过氧乙酸与0.02％过氧乙酸杀菌效果比较：0.02％过氧乙酸明显增高(P<0.01)；0.01％过氧乙酸与0.02％2±氧乙酸杀菌效果比较：0.02％过氧乙酸明显增高(P<0.01)。 4、0.3％牛血清白蛋白作为有机干扰物的各试验组的比较：三种浓度过氧乙酸杀菌效果有显著差异(P<0.01)；0.005％过氧乙酸与0.01％过氧乙酸杀菌效果比较无明显差异(P>0.05)；0.02％过氧乙酸的杀菌效果明显比0.005％过氧乙酸增高(P<0.01)；0.01％过氧乙酸与0.02％过氧乙酸杀菌效果比较：0.02％过氧乙酸明显增高(P<0.O1)。 5、3％牛血清白蛋白和0.3％牛血清白蛋白有机干扰物作用下的杀菌效果的比较：0.005％过氧乙酸的杀菌效果，3％牛血清白蛋白组明显低于0.3％牛血清白蛋白组(P<0.01)；0.01％过氧乙酸的杀菌效果，3％牛血清白蛋白组与0.3％牛血清白蛋白组无明显差异(P>0.05)；0.02％过氧乙酸的杀菌效果，3％牛血清白蛋白组与0.3％4匕血清白蛋白组比较无明显差异(P>0.05)。结论1、过氧乙酸浓度0.005％～0.02％范围内，随着浓度的提高，灭菌效果逐渐增高。 2、对医院物品和器械进行消毒时选择0.01％过氧乙酸作用5分钟或0.02％过氧乙酸作用1分钟可达到满意灭菌效果；0.01％过氧乙酸作用10分钟或0.02％过氧乙酸作用5分钟可达到灭菌状念。 3、有机干扰物(牛血清白蛋白)可影响低浓度(0.005％)过氧乙酸的杀菌效果，但对高浓度(0.01％，0.02％)过氧乙酸杀菌效果没有明显影响。 应用所研究的消毒剂于临床，评估对鲍曼不动杆菌的效果，以达到指导临床工作，降低感染率、缩短病人平均住院天数、减少病人的费用，减少不动杆菌耐药菌株在病人中的传播，预防和控制暴发流行。

目录

前 言

材料和方法

结果

讨 论

结 论

参考文献

图片

附表

过氧乙酸消毒应用研究进展

致 谢