乳腺癌转移抑制因子(BRMS1)在人乳腺癌中的表达和生物学功能

摘要

目的：通过PCR方法研究乳腺癌转移抑制因子1（BRMS1）在人乳腺癌细胞系MDAMB-231和MCF-7中的表达受体。通过进行细胞功能试验，研究乳腺癌转移抑制因子1（BRMS1）对于人乳腺癌细胞MDAMB-231和MCF-7在迁移、侵袭等方面的生物学影响及作用机制。通过分析临床、病理资料，研究乳腺癌转移抑制因子1（BRMS1）的mRNA表达水平与乳腺癌患者预后之间的相关性。
　　方法：质粒(MDA231PEF，MCF-7PEF)通过克隆到大肠杆菌中进行转型，然后通过PCR实验选择正确的质粒结构并进行扩增。对MDAMB-231和MCF-7细胞系进行RNA提取并进行RNA定量，使用cDNA分析仪进行反转录。通过加入核酶的PCR实验将BRMS1进行部分基因敲除，将基因部分敲除的BRMS1(MDAMB231brms1kd，MCF7brms1kd)通过大肠杆菌进行克隆，然后进行扩增、纯化。通过PCR方法研究BRMS1在人乳腺癌细胞系MDAMB-231和MCF-7中的表达。
　　在乳腺癌组织样本中对乳腺癌转移抑制因子1(BRMS1)的基因转录本进行量化，在人乳腺癌细胞系MDAMB-231和MCF-7中对乳腺癌转移抑制因子(BRMS1)的表达进行基因修饰，并进一步检测其生物学反应，同时对影响BRMS1的关键信号通道进行研究。
　　通过分析临床、病理资料，对乳腺癌转移抑制因子1(BRMS1)在人类乳腺癌中的转录表达水平进行了定量评估。
　　结果：乳腺癌转移抑制因子1（BRMS1）被证实在人乳腺癌细胞系MDAMB-231和MCF-7中均有明显的表达。与各自的野生型及对照细胞比较，部分基因敲除后的乳腺癌转移抑制因子在MDAMB-231和MCF-7细胞的生长、迁移、侵袭方面都有明显的作用(p＜0.05)。磷脂酶Cγ(PLCγ)对乳腺癌转移抑制因子1(BRMS1)诱导的细胞迁移有明显的影响。乳腺癌转移抑制因子(BRMS1)的表达水平在高级别的肿瘤中(p=0.12)、存在远处转移的病人中(p=0.05)及死于乳腺癌的病人中(p=0.0037)明显降低，另外，BRMS1水平低的患者存在一个明显缩短的总体生存率(p=0.035)。
　　结论：乳腺癌转移抑制因子1（BRMS1）在人乳腺癌细胞系MDAMB-231和MCF-7中存在表达受体。乳腺癌转移抑制因子(BRMS1)可能影响乳腺癌细胞的侵袭和迁移。BRMS1作为细胞侵袭和迁移的抑制分子，可能通过PLCγ细胞信号通道起作用。乳腺癌转移抑制因子(BRMS1)在人乳腺癌中的表达水平与疾病进展和患者的生存率呈负相关。

目录

声明

摘要

前言

资料与方法

1 材料

2 方法

结果

1 BRMS1及其受体在乳腺癌细胞系MDA MB-231和MCF-7中均有表达

2 部分基因敲除的BRMS1(MDA231BRMS1rib1，MCF7BRMS1rib1)及其受体在乳腺癌细胞系MDA MB-231和MCF-7中的表达减弱

3 部分基因敲除的BRMS1对乳腺癌细胞的迁移和侵袭有明显的影响

4 PLCγ在BRMS1介导的细胞迁移中的潜在作用

5．BRMS1在人类乳腺肿瘤中的表达及其与乳腺癌临床病理分期的联系

讨论

结论

参考文献

图表说明

综述 乳腺癌转移抑制因子1(BRMS1)研究现状

致谢

攻读硕士研究生期间发表的论文