声明
摘要
缩略符号说明
1．1木质纤维素乙醇发酵
1．2木糖发酵重组酿酒酵母
1．2．1木糖代谢途径在酿酒酵母中的构建
1．2．2酿酒酵母中木糖代谢途径节点优化
1．2．3菌株诱变和适应性进化提高重组酿酒酵母木糖利用能力
1．3酿酒酵母木糖代谢中的全局调控问题研究
1．3．1木糖作为半发酵型碳源的代谢特征
1．3．2酿酒酵母糖感应信号途径在木糖为碳源时的状态
1．3．3酿酒酵母木糖代谢受到葡萄糖后继效应影响
1．3．4全局调控策略改善酿酒酵母木糖代谢
1．4本论文的研究意义及主要内容
第二章扰动转录因子Thi2p和Nrm1p缓解葡萄糖后继效应
2．1导言
2．2材料与方法
2．2．1质粒与菌株
2．2．2培养基
2．2．3主要实验试剂
2．2．4仪器与设备
2．2．5微生物学技术
2．2．6分子生物学技术
2．3结果与讨论
2．3．1菌株在GX阶段的代谢活性低于X阶段
2．3．2菌株在GX阶段和X阶段的转录组差异
2．3．3糖酵解基因FBA1，TDH2,GPM1的表达水平不是木糖发酵的瓶颈
2．3．4扰动在GX阶段和X阶段显著变化的转录因子的影响
2．3．5过表达细胞周期相关的转录因子基因NRM1促进木糖代谢
2．4本章小结
第三章Thi2p调控网络控制酿酒酵母葡萄糖对木糖的后继效应
3．1导言
3．2材料与方法
3．2．1质粒与菌株
3．2．2培养基
3．2．3主要实验试剂
3．2．4仪器与设备
3．2．5微生物学技术
3．2．6分子生物学技术
3．3结果与讨论
3．3．2 THI2缺失菌株的转录组分析
3．3．2在GX阶段Thi2p介导的调控网络及其对木糖代谢的影响
3．3．4敲除THI2通过降低培养物中死细胞比例促进木糖代谢
3．3．4在生物反应器中STT4，RGI2和TFC3促进木糖厌氧发酵
3．4本章小结
第四章转录因子Tee1p缓解葡萄糖后继效应的机制研究
4．1导言
4．2材料与方法
4．2．1质粒与菌株
4．2．2培养基
4．2．3主要实验试剂
4．2．4仪器与设备
4．2．5微生物学技术
4．2．6分子生物学技术
4．3结果与讨论
4．3．1从转录组数据预测与木糖利用相关的转录因子
4．3．2 GX阶段处于低TORC1活性状态
4．3．3不同碳源条件Tec1p蛋白水平的变化
4．3．4阻止MAPK途径诱导的Tec1p降解促进GX阶段木糖代谢及其机制初探
4．3．5 TEC1T273M原位突变菌株的转录组结果分析
4．4本章小结
第五章抑制酿酒酵母利用木糖的胞外代谢物探索
5．1导言
5．2材料与方法
5．2．5微生物学技术
5．2．6分子生物学技术
5．3结果与讨论
5．3．1发酵液中残留有耐热、耐蛋白酶的信号分子影响木糖代谢
5．3．2胞外代谢组学分析
5．3．3检测部分代谢物对木糖代谢的影响
5．4本章小结
6．1全文总结
6．2展望
附录
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
资助项目
