摘要
缩略词表
文献综述
1．4 SCSMV的基因组结构
2 RNA沉默
2．1 RNA沉默的发现
2．2 RNA沉默的基本过程
2．3 RNA沉默通路中的关键因子
3．RNA沉默抑制子研究进展
3．1结合长dsRNA抑制DCL切割
3．2结合双链siRNA抑制RISC复合体的形成
3．3作用于RNA沉默通路的关键蛋白
4．亚细胞定位对VSRS抑制能力及致病性的影响
4．2亚细胞定位对VSRs抑制活性的影响
4．3亚细胞定位对VSRs致病性的影响
5研究目的与意义
1材料
1．3酶和化学试剂
2试剂、溶液和培养基的配制
2．1常用试剂、溶液和培养基
2．2 Western blot相关试剂
2．3农杆菌介导的瞬时表达系统相关试剂
3实验方法
3．1植物总RNA的提取
3．2反转录
3．3 PCR(聚合酶链式反应)
3．4 PCR产物的纯化
3．5 DNA片段与载体的连接
3．6 Gateway反应体系
3．7大肠杆菌DH5α感受态的制备与转化
3．8质粒提取
3．9农杆菌感受态的制备与转化
3．10农杆菌浸润法介导的瞬时表达
3．11长波紫外灯下观察与拍摄及激光共聚焦显微镜观察
3．12Western blot检测
3．13 DAB染色
3．14台盼蓝染色
1 P1蛋白的沉默抑制功能分析
1．1表达载体的构建
1．2 P1蛋白的局部沉默抑制功能研究
1．3 P1蛋白的系统沉默抑制功能研究
2 P1蛋白对病毒致病性的影响
3 P1蛋白的亚细胞定位
4 P1蛋白核定位信号突变对其沉默抑制功能的影响
5 P1蛋白核定位信号突变对病毒致病性的影响
讨论
参考文献
附录
攻读学位期间发表的论文
致谢
声明
