五氯酚降解菌的驯化、筛选及其降解性能的研究

摘要

五氯酚（pentachlorophenol，PCP）曾作为木材防腐剂、除草剂、杀菌剂、杀虫剂等在工农业生产中被广泛应用。因其化学性质稳定、在环境中难以降解，严重威胁自然环境和人类健康。目前国际癌症研究总局（IARC）已经将其归为“可能的致癌物”。现有的PCP污染处理方式有物理技术、化学技术与生物处理技术。其中，生物处理技术因其具有投入低、治理效果好以及无二次污染等优点，已逐步被应用到PCP污染的治理工作中。
　　 本研究采用活性污泥曝气与密度梯度驯化方法，以五氯酚为唯一碳源，定时定量逐步提高PCP浓度，经过8周驯化分离得到3株五氯酚降解菌，分别降解含有等量PCP的无机盐溶液，采用高效液相色谱法对它们的降解能力进行检测，其中菌株A降解能力较强，48h的降解率为98.6％。对菌株A进行生理生化及16S rDNA序列分析，该菌株初步鉴定为施式假单胞菌。菌株A的最适生长温度为30℃，pH为7.0，该菌在浓度为3％NaCl的普通培养基中生长良好，属于耐盐菌。
　　 通过测定不同PCP含量、接种量、温度及pH条件下菌株A对PCP的降解效率，确定最适降解条件。结果表明，高效降解菌A降解PCP的最适条件是：五氯酚初浓度为0.2～0.4 g/L，接种量为2～3ml（108cfu/ml），温度为30℃、pH为 6.0。
　　 使用碱裂解法对菌株A进行质粒提取，琼脂糖凝胶电泳结果显示菌株A包含一大小约700bp的质粒。SDS–变温质粒消除实验表明质粒消除后的菌株A对PCP的耐受力明显下降，降解率也降低至13.7％。以E.coli 为受体菌做质粒转化试验，对质粒转化成功的E.coli 进行PCP降解试验，检测得到其降解率为84.3％，降解活性略低于菌株A。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略词（Abbreviation）

声明

前 言

第一部分 PCP高效降解菌的驯化、筛选及鉴定

第二部分 PCP高效降解菌A的降解特性研究

第三部分 PCP降解相关基因的克隆

参考文献

综述

附录

致 谢