先兆子痫模型的建立与MDSC在先兆子痫中的作用及机制初探

摘要

目的：
　　先兆子痫(preeclmpsia，PE)是一种临床上常见的妊娠期并发症，其发病率大约在2％到8%，这种疾病的发生严重影响母胎发病率及死亡率。因此，先兆子痫的发病机制一直都是科学家研究的热点。机体免疫系统异常在PE的发生发展中起重要作用，全身性的免疫细胞活化可能是PE发病机制的重要原因之一。髓系衍生抑制细胞(myeloid derivedsuppressor cell，MDSC)是一种髓系抑制细胞，在正常妊娠中调节T细胞应答，而其在先兆子痫中的作用却鲜有研究。该研究目的主要是通过给予不同物质建立小鼠先兆子痫模型，以帮助研究先兆子痫的发病机制，观察PE模型中脾脏细胞的凋亡改变，并最先提出MDSC在先兆子痫的发病中可能起到重要作用。
　　方法：
　　1.小鼠妊娠12天至15天时，给予腹腔注射0.35mg/kg的氯化镉（CdCl2），观察模型小鼠血压、尿蛋白改变，胎盘、胎仔重量改变，观察脾脏的大小及重量的改变，胎盘、肾脏形态学变化。
　　2.小鼠妊娠第12天时，给予腹腔注射14ug/kg的LPS，小鼠妊娠第13-15天时，给予腹腔注射56ug/kg的LPS。观察模型小鼠血压、尿蛋白改变，胎盘、胎仔重量改变，观察脾脏的大小及重量的改变，胎盘、肾脏形态学变化。
　　3.通过TUNEL法检测脾脏细胞凋亡形态学改变，Western blotting法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达情况，对比正常妊娠小鼠与先兆子痫模型小鼠脾脏的凋亡情况。
　　4.通过流式细胞学，检测正常妊娠小鼠和先兆子痫模型小鼠脾脏中MDSC的改变结果：
　　1.低剂量CdCl2或LPS注射孕鼠腹腔，均可使孕鼠血压升高、尿蛋白增加、胎盘及胎仔重量较正常妊娠明显下降，出现明显先兆子痫样临床症状。
　　2.低剂量CdCl2或LPS注射孕鼠腹腔，脾脏明显增大，脾脏细胞凋亡明显减少。脾脏组织中Bcl-2表达增多，Bax表达减少。
　　3.正常妊娠时脾脏中MDSC较未妊娠小鼠的数目增多，低剂量LPS注射致PE小鼠模型中脾脏MDSC增加更为显著。
　　结论：
　　1.低剂量的CdCl2或LPS腹腔注射孕鼠均可以成功构建PE模型，且模型重复性好，能较好的模拟人体PE的临床改变，是可以研究PE发病机制的较好的小鼠模型。
　　2.通过低剂量的CdCl2或LPS腹腔注射孕鼠的PE模型中，脾脏细胞凋亡减少，免疫细胞活化。
　　3.MDSC作为免疫抑制细胞在PE模型中的增多，可能通过改变母体耐受而诱导PE的发生。

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英文缩略词表

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前言

材料和方法

一、主要试剂和仪器

二、实验方法

结果

第一部分低剂量CdCl2注射小鼠PE模型的建立与PE中脾脏细胞的凋亡改变

第二部分低剂量LPS注射小鼠PE模型的建立与MDSC在PE中的作用研究

讨论

小结

参考文献

综述: 应激对妊娠期疾病的影响

致谢