RBM19、RBM23、RBM34和RBM47在肾透明细胞癌中的临床意义及对肿瘤发生发展的影响

摘要

目的：研究RBM家族成员 RBM19、RBM23、RBM34和RBM47在肾透明细胞癌中的表达、临床意义及在肿瘤发生发展过程中的作用。
　　方法：从TCGA数据库中筛选肾透明细胞癌和癌周正常组织 mRNA差异表达以及与预后相关的RBM家族成员。通过多因素 Cox回归分析建立由上述方法筛选出的RBM家族基因组成的模型，并讨论由模型得到的风险评分作为独立预后因素的价值。免疫组化检测其在肾透明细胞癌以及癌周正常组织的表达，并在蛋白水平分析其与临床病理数据的相关性。过表达或敲减目的基因后行集落形成试验和 MTS检测肾透明细胞癌细胞的增殖能力。Transwell试验检测肾透明细胞癌细胞的侵袭和迁移能力。
　　结果：从72对TCGA肾透明细胞癌及其癌周正常组织中筛选出差异表达及预后相关的RBM19、 RBM23、 RBM34和 RBM47，其中RBM19、RBM34高表达，RBM23、RBM47低表达，并且 RBM19、RBM34低表达和 RBM23、RBM47高表达组患者预后明显更好。由 RBM19、RBM23、 RBM34和 RBM47构建的模型显示风险评分可以作为肾透明细胞癌患者独立的预后因素，并且高风险组患者的总体生存率明显低于低风险组。通过80对肿瘤组织及其对应癌周正常组织的免疫组化验证同样表明 RBM19、 RBM34高表达，而 RBM23、RBM47低表达。Fuhrman分级、原发肿瘤、远处转移和临床分期与 RBM19、RBM34表达正相关，与RBM23、RBM47表达负相关。敲减RBM19、RBM34或过表达RBM23、RBM47肾透明细胞癌细胞增殖、侵袭、迁移能力减弱。
　　结论：RBM19、 RBM23、 RBM34和 RBM47可能作为肾透明细胞癌分级、分期和预后的分子标志物。相较于癌周正常组织，RBM19、RBM34在肾透明细胞癌组织中上调而 RBM23、RBM47在肾透明细胞癌组织中下调。敲减RBM19、RBM34或过表达RBM23、RBM47抑制细胞的增殖、侵袭和迁移能力。其分子机制及下游靶基因有待进一步的探究。

目录

声明

主要缩略词表

1.引言

2.材料和方法

2.1肾透明细胞癌组织以及临床信息的收集

2.2免疫组化

2.3细胞系培养

2.4 RNA的提取和逆转录PCR

2.5载体构建

2.6病毒包装及目的细胞感染

2.7蛋白免疫印迹（Western Blot）

2.8细胞增殖试验

2.9细胞转移和侵袭能力分析

2.10数据统计

2.11仪器使用

3.结果

3.1 RBM家族基因表达谱及生存相关的RBM 家族成员的鉴定

3.2 四个RBM家族基因模型的建立以及其预后价值的分析

3.3 RBM19、RBM34在肾透明细胞癌中高表达而RBM23、RBM47低表达

3.4 RBM19、 RBM23、 RBM34和 RBM47与分级、TNM分期、临床分期相关

3.5 RBM19、RBM34敲减或RBM23、RBM47过表达抑制细胞的增殖能力

3.6 RBM19、RBM34敲减和RBM23、RBM47过表达抑制细胞的侵袭和迁移

4、讨论

参考文献

综述：肿瘤中RBM家族蛋白调控的可变剪接

致谢