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干预自噬对PTD4--apoptin蛋白抑制不同分化程度胃癌荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响

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1 前言

2 材料和方法

2.1细胞株和动物

2.2实验仪器

2.3 实验试剂

2.4试剂配制

2.5 细胞株的培养 及PTD4-Apoptin蛋白的制备

2.5.1细胞的复苏

2.5.2细胞传代

2.5.3 细胞冻存

2.5.4 中低分化人胃癌SGC7901细胞诱导去分化

2.5.5 PTD4-Apoptin蛋白的制备及纯化

2.6 建立中低分化人胃癌SGC7901细胞和低分化人胃癌SGC7901细胞移植瘤模型

2.6.1 裸鼠饲养

2.6.2 细胞的接种

2.6.3 裸鼠的分组

2.6.4 裸鼠给药和瘤体监测

2.6.5 裸鼠组织提取

2.7免疫组化分析LC3、P62、c-caspase3表达量

2.7.1 组织石蜡包埋

2.7.2 苏木素染色

2.7.3 免疫组化

2.8 western blot分析LC3、P62、c-caspase3蛋白的表达量

3 实验结果

3.2 PTD4-Apoptin蛋白联合CQ对不同分化程度人胃癌SGC7901细胞移植瘤肿瘤增殖的影响

3.2.1 肿瘤生长曲线

3.2.2 统计学分析

3.3 PTD4-apoptin蛋白联合CQ对不同分化程度人胃癌SGC7901细胞移植瘤中LC3、P62、c-caspase3蛋白的影响

3.3.1 两组胃癌细胞肿瘤HE染色

3.3.2 免疫组化分析PTD4-apoptin蛋白联合CQ对不同分化程度人胃癌SGC7901细胞移植瘤中LC3、P62、c-caspase3蛋白的影响:

3.3.3 Western Blot检测两种分化程度胃癌细胞不同给药组自噬相关蛋白LC3、P62的表达水平:

3.3.4 Western Blot检测两种分化程度胃癌细胞不同给药组c-caspase3蛋白的表达水平

4 讨论

5 结论

6 展望

参考文献

综述:肿瘤细胞自噬与凋亡的临床研究

致谢

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