阿霉素脂质体与致孔肽相互作用的研究

摘要

目的：
　　阿霉素（doxorubicin, DOX）又称多柔比星，是蒽环霉素类抗生素。在上世纪60年代初首次从一种链霉菌中分离出来。阿霉素对恶性肿瘤的治疗范围很宽。广泛用于治疗血液系统癌症、实体瘤和肉瘤。在上世纪60年代末，阿霉素在临床试验中则显示出了抗肿瘤的疗效，但是对正常细胞有毒性作用，因此提高药物的靶向性和降低药物的毒性是研究的重点。
　　脂质体（liposome）是人工制备的由磷脂双分子定向排列而成的封闭囊泡，具有良好的靶向作用。脂质体作为药物输送系统，具有改善药物的药代动力学、体内分布和降低毒性的优点。近年来，相关研究显示，用脂质体载运的阿霉素不仅抗肿瘤作用类似或稍强于游离的阿霉素，而且能显著减少心脏毒性作用，治疗范围得到扩大。对脂质体进行靶向修饰更能增强药效降低毒副作用。
　　致孔肽（pore-forming peptide）是一种线性肽，具有α螺旋构象，广泛存在于自然界中。它可以诱导脂质膜的渗透，在膜的表面自组装形成孔，使得小分子物质从膜内流出。将致孔肽与脂质体载体连接，促使药物分子从脂质体内快速释放到肿瘤细胞外，增强药物在肿瘤部位的聚集。
　　本文通过硫酸铵梯度法制备了阿霉素脂质体载体。并对其外观形态、粒径、包封率进行了稳定性考察，筛选出理化性质优良的处方。通过考察脂质体载体的荧光泄露，考察脂质体载体与致孔肽的相互作用特征。
　　方法：
　　通过查阅文献及实验研究，确定了阿霉素脂质体的制备方法。采用薄膜分散法制备空白脂质体，采用硫酸铵梯度法进行药物装载。通过测定载药脂质体的粒径、电位、包封率对载体进行表征。
　　以粒径、多分散系数、包封率、释放度为考察指标，重点研究了载体的物理化学稳定性（以粒径、多分散系数、包封率为指标）和载药稳定性（以释放度为指标），筛选出最佳的制剂处方。
　　使用高通量实时荧光分析系统，考察脂质体载体的荧光泄露率，评价脂质体载体与致孔肽作用能力，筛选出合适的脂质体载体和致孔肽。
　　结果：
　　根据不同脂材配比，不同的制备条件，制备了7种阿霉素脂质体。阿霉素脂质体载体粒径在110 nm~150 nm之间，分布均匀，成正态单峰分布。PDI小于0.3，阿霉素脂质体载体的zeta电位均呈负电性。阿霉素脂质体载体的包封率在83％~99%之间。
　　POPC-DOX放置30天后，脂质体载体颜色变深，出现分层，粒径、PDI、包封率变化较大，表明POPC-DOX脂质体载体稳定性较差。其余6种脂质体载体放置60天后，脂质体载体外观无分层，色泽均一，粒径、PDI、包封率变化较小，表明剩余6种脂质体载体有较好的稳定性。
　　释放度测定结果表明，脂质体载体在三种释放介质中，累积释放率相对较低，稳定性较好。
　　通过荧光泄露实验，建立了脂质体载体与致孔肽相互作用的评价方法，通过考察阿霉素荧光泄露，评价致孔肽作用于脂质体载体的通透性能力。
　　结论：
　　脂质体载体的制备方法简便，并且制备时间短，经过多个批次脂质体表征结果验证，此制备方法的重现性较好，包封率测定方法简便。建立了脂质体载体与致孔肽相互作用的评价方法，通过考察阿霉素荧光泄露，评价致孔肽作用于脂质体载体的通透性能力。

目录

声明

英文缩写

引言

第一部分载体制备和表征

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

第二部分载体稳定性考察

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

第三部分载体与致孔肽相互作用

前言

材料与方法

结果

附图

讨论

小结

参考文献

结论

综述:阿霉素脂质体应用于癌症治疗的研究进展

致谢

个人简历