系统性红斑狼疮患者调节性T细胞亚群和自身抗体聚类分析

摘要

目的：系统红斑狼疮患者自身耐受机制的缺陷，引起自身反应性T和B细胞过度活跃，产生多种无器官特异性的针对自身细胞核成分的自身抗体，导致疾病的发生、发展。以CD4+CD25+Foxp3+标记的调节性T细胞(简称Treg)具有免疫抑制活性，在外周免疫耐受中发挥着重要作用，其根据CD45RA、CD62L、CCR7可以分为初始型Treg亚群和记忆型Treg亚群。理论上推测Treg数目减少和(或)功能下降与SLE发病，特别是病情活动有关，但实际上，多个临床研究的结果不尽一致，可能与不同研究者采用不同的标志物标记的Treg有关，也可能与SLE患者使用糖皮质激素和细胞毒药物等对Treg的影响有关。SLE的免疫紊乱多样化，导致患者自身抗体谱和临床表现的多样化，而且两者间存在一定的关联，如抗dsDNA与肾损害，抗SSA与光敏感，抗RNP与雷诺现象。此外，SLE患者的预后不一，自身抗体聚类分析有助于鉴别出不同的临床亚型，因而可以对器官损伤、病程、预后做出预测。然而，目前尚缺乏对中国南方SLE病人的大样本调查结果。
　　 本研究旨在了解我国南方SLE患者自身抗体与临床表现相关性及自身抗体亚型的特点，同时探讨由CD4+CD25+FoxP3+标记的Treg(简称Treg-FoxP3)和CD4+CD25+CD127low/-标记的Treg(简称Treg-CD127low/-)及CD45RA、CD62L、CCR7、CTLA-4标记两者的亚群在SLE发病机制中的作用。
　　 方法：对917例系统性红斑狼疮住院患者进行回顾性研究，同时流式细胞仪检测45例SLE患者和45例健康自愿者外周血CD4+T细胞中CD4+CD25+FoxP3+Treg及其亚群所占的百分比。
　　 结果：
　　 ⑴自身抗体与临床表现：抗dsDNA抗体与肾损害、白细胞减少、贫血呈显著正相关；抗Sm抗体与面颊红斑/盘状红斑、心包炎、白细胞减少呈显著正相关；抗RNP抗体与雷诺现象、光敏感呈显著正相关；抗DNP抗体与关节炎呈显著正相关，与肾损害呈显著负相关；抗Scl-70抗体与贫血、雷诺现象呈显著正相关；抗Jo-1抗体与心包炎呈显著正相关；抗着丝粒抗体与雷诺现象呈显著正相关。
　　 ⑵自身抗体聚类分析：根据抗提取核自身抗体(抗Sm、RNP、SSA、SSB抗体)把917例SLE患者分成3种亚型：亚型Ⅰ抗Ro、Sm、RNP抗体多阳性(简称[Ro/Sm/RNP])，50岁以下的人群好发，光敏感、面部红斑/盘状红斑、雷诺现象、白细胞减少发生率高；亚型Ⅱ抗Ro抗体阳性(简称[Ro])，15岁以上的人群好发，抗DNP阳性率高于亚型Ⅲ；亚型Ⅲ抗Sm、RNP、SSA、SSB抗体多阴性[简称[ENA Ve]]，ANA阳性率低于亚型Ⅰ和亚型Ⅱ。
　　 ⑶SLE患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+标记的Treg与CD4+CD25+CD127low/-标记的Treg在数量、与临床表现和实验室指标的相关性方面均有许多不同。
　　 ⑷SLE患者外周血Treg(CD4+CD25+Foxp3+T cells，下同)较健康对照组显著增高，然而表达CD62L或CTLA-4(CD152)的Treg亚群较健康对照组均显著降低。
　　 ⑸SLE患者外周血Treg与血白细胞(WBC)、淋巴细胞(Ly)、血小板(PLT)呈显著负相关；表达CD62L的Treg亚群与WBC和PLT均呈显著负相关。Treg与血清免疫球蛋白IgM呈显著负相关，与C反应蛋白(CRP)呈显著正相关。其中表达CD62L的Treg亚群与IgG呈显著负相关；表达CCR7和CCR7+CD62L+Treg亚群均与ESR呈显著负相关。
　　 ⑹SLE患者外周血中Treg与血清抗核抗体(ANA)、抗核小体抗体(AnuA)、抗组蛋白抗体(AHA)、抗双链DNA抗体(dsDNA)均无显著相关。表达CD45RA的Treg与AHA呈显著负相关；表达CD62L的Treg亚群与AnuA、AHA、dsDNA均呈显著负相关；CD45RA+CD62L+的Treg亚群与AnuA、AHA、dsDNA均呈显著负相关；表达CCR7的Treg亚群、CD62L+CCR7+的Treg亚群与AHA呈显著负相关。
　　 ⑺有肾损的SLE患者外周血中Treg显著高于无肾损组和健康对照组。有光敏感的SLE患者外周血中Treg显著高于无光敏感组；无光敏感的SLE患者组中Treg较健康对照组显著增高。有血液系统损伤的SLE患者外周血中表达CD45RA的Treg亚群较无血液系统损伤组和健康对照组均显著降低。有神经系统损伤的SLE患者外周血中的Treg显著高于无神经系统损伤组和健康对照组；无神经系统损伤的SLE患者组中的Treg显著高于健康对照组。
　　 ⑻活动期和稳定期SLE患者外周血中Treg均显著高于健康对照组，而活动期SLE和稳定期SLE患者间无显著性差异；活动期SLE患者外周血中表达CD62L+的Treg亚群较稳定期组和健康对照组均显著降低；SLE活动组CD45RA+CD62L+的Treg亚群较稳定期组和健康对照组均显著降低；SLE患者外周血中表达CD62L的Treg亚群与SLEDAI有显著性负相关。已治疗的SLE患者外周血中的Treg显著高于SLE未治组和健康对照组；未治SLE患者Treg与健康对照组间无显著性差异。
　　 结论：①我国SLE患者具有3种不同的自身抗体亚型和特殊的临床表现与自身抗体的相关性，如抗RNP与光敏感呈显著正相关，抗DNP与肾损害呈显著负相关。②SLE患者外周血中以CD4+CD25+Foxp3+标记的Treg较以CD4+CD25+CD127low/-标记的Treg特异性强。③SLE患者机体炎症和损伤可能通过刺激外周血中的Treg升高，参与负调控和维持自身免疫耐受，表达CD62L的Treg亚群下降可能参与SLE的自身免疫性炎症过程和靶器官损害。④激素或激素联合免疫抑制剂治疗可能通过上调SLE患者外周血中的Treg而发挥疗效。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：主要英文缩略词表

声明

第一部分SLE患者自身抗体聚类分析及其与临床、实验室指标的相关性分析

1研究方法

2结果

3结果总结

4讨论

5结论

第二部分SLE患者Treg及其亚群与临床、实验室指标的相关性研究

1材料与方法

2实验方法

3实验结果

4结果总结

5讨论

6结论

总结与展望

参考文献

综述 药物对调节性T细胞的影响

攻读博士期间发表的论文

致谢