富白细胞及血小板纤维蛋白凝胶对BMSCs在兔股骨头缺血性坏死中成骨作用的影响

摘要

目的：
　　从世界范围的研究来看，股骨头缺血性坏死发病率较高，非手术的保髋治疗和早期的手术干预治疗疗效各异，最终目的为延缓股骨头坏死的进程，推迟或者避免全髋关节置换手术。富白细胞和血小板纤维蛋白（leucocyte and platelet-rich fibrin L-PRF），为新一代的血液浓缩制品，能提供生理性的三维支架，各种丰富的生长因子和抗炎作用的富白细胞。骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs）为成骨种子细胞，能促进新骨形成和促进血管源性生长。本研究通过建立早期股骨头缺血性坏死兔模型并探讨富白细胞和血小板纤维蛋白凝胶在治疗早期兔股骨头缺血性坏死对BMSCs成骨分化作用的影响。
　　方法：
　　4～6月龄新西兰大白兔48只，体重2.0～3.0kg，雌雄不拘。随机分成A、B、C、D4组（n=12），每只兔实验前，于心跳最强处抽血，离心，静置，弃上清液和底层的红细胞，取中间富白细胞和血小板纤维蛋白凝胶。取两侧髂后上嵴处穿刺抽取骨髓，培育骨髓间充质干细胞并鉴定，液氮冷冻建立双侧ANFH模型。A组：单纯行髓芯减压；B组：髓芯减压联合L-PRF移植；C组：髓芯减压联合BMSCs移植；D组：髓芯减压联合BMSCs及L-PRF移植。术后4、8、12周，摄X线片，观察髋关节和骨缺损灶骨密度变化，并行Lane-Sandhu X线片评分评价成骨情况；取各组股骨头标本，行组织学观察及血管计数、新生骨面积百分比。
　　结果：
　　富白细胞和血小板纤维蛋白凝胶为半透明白色凝胶状。骨髓间充干细胞为梭形单核细胞。影像学X射线评分情况组织学血管计数、新生骨面积百分比，第4、8、12周时，C、D组优于A、B组，D组优于C组，B组优于A组，各组间的差异有统计学意义（P<0.05)。
　　结论：
　　在股骨头缺血性坏死的兔模型中，通过髓芯减压，使用新一代血液制品富白细胞和血小板纤维蛋白凝胶联合骨髓间充质干细胞对成骨的影响，比单一应用富白细胞和血小板纤维蛋白或骨髓间充质干细胞对成骨作用更加明显，为今后临床治疗股骨头缺血性坏死打下理论基础。

目录

声明

英文缩略词对照表

1 前言

2 材料和方法

2.1实验动物

2.2主要试剂，器材

2.3实验原理及方法

3 结 果

3.1 L-PRF凝胶形态

3.2 BMSCs鉴定结果

3.3 ANFH动物情况观察

3.4 影像学观察结果

3.5 组织学结果

4 讨 论

5 结论

参考文献

附录个人简历

致谢

综述:富白细胞及血小板纤维蛋白在股骨头缺血性坏死修复中的研究和进展