长期噪声暴露对大鼠海马及皮层tau蛋白磷酸化的影响

摘要

背景：噪声暴露对非听觉系统的影响，通过流行病学调查和实验研究，长期噪声暴露对致tau蛋白异常磷酸化和引起拟AD样病理性变化，然而，实验数据是有限的。
　　目的：研究长期噪声暴露对海马及皮层tau蛋白各关键抗原表位磷酸化的动态影响及远期效应，探讨tau蛋白磷酸化的作用机制。
　　方法：40只健康雄性wistar大鼠，耳廓反射灵敏，随机分为对照组（16只）和噪声暴露组（24只），噪声暴露组分为噪声暴露后0天组，3天组，7天组，14天组，每组6只，每组分别设立对照组，每组4只。噪声暴露条件为：白噪声100Db SPL，4 h/d（8：00-12:00），共14d。噪声暴露结束后，迅速剥离海马与前额皮层，用RIPA裂解液提取可溶的磷酸化tau，70％的甲酸提取不溶性NFT-tau，Western Blot检测 tau蛋白各位点（Ps202，Ps396，Ps404，Ps422）和Tau-c的磷酸化状态。
　　结果：长期噪声暴露后0、3、7天，大鼠海马 tau蛋白在 AD相关位点Ser202/Ser396/Ser404/Ser422的磷酸化水平显著性增高，之后呈现恢复趋势，暴露后14天时，海马tau蛋白各位点磷酸化水平与对照组相比已无显著差异；长期噪声暴露同样可导致皮层 tau蛋白磷酸化状态持续异常改变，在观察期内（暴露后0-14d）tau蛋白在Ser202/Ser422位点一直呈现异常磷酸化状态，在Ser396位点的异常磷酸化状态也一直持续至暴露后14d才呈现恢复趋势，而tau蛋白在Ser404位点的异常磷酸化状态只出现在暴露后7d；长期噪声暴露对海马及皮层tau-c（C末端磷酸化及非磷酸化）未见显著影响。长期噪声暴露还可导致皮层及海马不溶性磷酸化（Ser396/Ser404）tau蛋白（NFT-tau）的产生，NFT-tau均在暴露后3d出现，呈迟发性特点。
　　结论：长期噪声暴露引起大鼠海马及皮层tau蛋白在神经退行性病变相关位点持续性异常磷酸化，并进一步引发了迟发型病理不溶性NFT-tau蛋白的形成，表明长期噪声暴露可能存在致神经系统损害的潜在风险。

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缩略语表

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前言

一、实验材料及研究方法

1.1 实验动物与模型建立

1.1.1实验动物及分组

1.1.2 噪声暴露

1.2 主要仪器

1.3 主要药品及试剂

1.4 主要溶液配置

1.5M Tris-HCl（pH8.8）

1.5.1脑组织蛋白提取

1.5.2 免疫印迹检测海马、皮层各蛋白的表达水平

1.5.3 免疫印迹蛋白条带积分光密度分析

1.5.4 统计分析

二、实验结果

2.1 长期噪声暴露对大鼠海马及皮层可溶性磷酸化tau蛋白的影响

2.1.1 长期噪声暴露对大鼠海马及皮层tau-C的影响

2.1.2 可溶性磷酸化tau蛋白在海马及皮层Ser202位点的变化情况

2.1.3 可溶性磷酸化tau蛋白在海马及皮层Ser396位点的变化情况

2.1.4可溶性磷酸化tau蛋白在海马及皮层Ser404位点的变化情况

2.1.5可溶性磷酸化tau蛋白在海马及皮层Ser422位点的变化情况

2.2长期噪声暴露对大鼠海马及皮层不溶性磷酸化tau蛋白的影响

2.2.1 海马及皮层不溶性磷酸化tau蛋白在Ser202位点的变化情况

2.2.2 海马及皮层不溶性磷酸化tau蛋白在Ser396位点的变化情况

2.2.3 海马及皮层不溶性磷酸化tau蛋白在Ser404位点的变化情况

2.2.4 海马及皮层不溶性磷酸化tau蛋白在Ser422位点的变化情况

2.3长期噪声暴露对大鼠海马及皮层Gsk-3β（S13）和PP2A的影响

2.3.1 长期噪声暴露对大鼠海马Gsk-3β（S13）的影响

2.3.2 长期噪声暴露对大鼠皮层Gsk-3β（S13）的影响

2.3.3 长期噪声暴露对大鼠海马PP2A的影响

2.3.4 长期噪声暴露对大鼠皮层PP2A的影响

三、讨 论

3.1噪声参数的选择

3.2长期噪声暴露与 tau蛋白磷酸化

3.3长期噪声暴露后tau蛋白异常磷酸化的机制

四、结论

参考文献

综述

论著

个人简历

致谢