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符号或缩略词说明
第一章 文献综述
1.1引言
1.2植物硒吸收代谢的研究进展
1.2.1植物对硒的吸收
1.2.2 硒在植物体内的形式
1.2.3 硒对植物的影响
1.2.4同型半胱氨酸甲基转移酶(HMT)的研究进展
1.3富硒小麦的研究进展
1.3.1小麦硒营养的研究进展
1.3.2 富硒小麦的培育
1.4小麦分子育种的重要材料:一粒小麦
1.5论文选题依据
1.6主要研究内容及技术路线
1.6.1主要研究内容
1.6.2技术路线
第二章 野生一粒小麦HMT1基因的克隆及生物信息学分析
2.1引言
2.2材料与方法
2.2.1材料
2.2.2实验仪器、试剂
2.2.3提取植物总RNA
2.2.4 RNA完整性检测
2.2.5总RNA 纯度检测
2.2.6 引物设计
2.2.7 RNA反转录
2.2.8 PCR扩增野生一粒小麦10-1HMT1基因
2.2.9 目的片段的回收
2.2.10加“A”
2.2.11 pGEM-T Easy载体链接
2.2.12 连接产物转DH5α细胞
2.2.13 重组克隆筛选
2.2.14穿刺
2.2.15 送样测序
2.3结果与分析
2.3.1野生一粒小麦10-1HMT1基因的克隆和序列分析
2.3.2 TmHMT1基因序列与AetHMT1基因比对分析
2.3.3 TmHMT1同源性比对分析
2.4讨论与结论
第三章 野生一粒小麦HMT1基因的生化特性分析
3.1引言
3.2材料和方法
3.2.1设计特异性引物及PCR扩增
3.2.2实验试剂及仪器
3.2.3 摇菌后培养
3.2.4 提取克隆质粒
3.2.5获得大量目的片段
3.2.6 酶切、连接目的条带,构建重组原核表达载体
3.2.7诱导表达重组质粒菌株及优化表达条件
3.2.8 SDS-PAGE鉴定
3.3结果与分析
3.3.1野生一粒小麦10-1HMT1基因原核表达载体的构建和重组子的鉴定
3.3.2目的蛋白的诱导表达、条件优化及SDS-PAGE分析
3.4讨论与结论
第四章 野生一粒小麦HMT1基因的功能验证
4.1引言
4.2材料与方法
4.2.1材料
4.2.2实验试剂及仪器
4.2.3 TmHMT1基因时空特性分析
4.2.4转TmHMT1基因细菌耐硒性研究
4.2.5转TmHMT1基因细菌富硒性研究
4.2.6样品消解
4.2.7仪器条件
4.2.8标准曲线的绘制
4.2.9样品测定
4.3结果与分析
4.3.1转TmHMT1基因细菌耐硒性分析
4.3.2转TmHMT1基因细菌富硒性分析
4.3.3 TmHMT1基因时空表达特性研究
4.4讨论与结论
第五章 结论与展望
5.1结论
5.2展望
参考文献
致谢
个人简历