声明
引言
材料与方法
1.实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要药品和试剂
1.3 实验仪器与耗材
2.实验方法
2.1 大鼠心肌细胞的原代培养
2.2 原代细胞培养分组
2.3 心肌细胞计数
2.5 使用CCK8试剂盒确定NFAT3抑制剂最佳使用浓度
2.6.钙离子荧光探针测定不同处理组心肌细胞内钙离子浓度
2.7酶联免疫吸附实验检测不同处理组心肌细胞内CaN含量
2.8.心肌细胞内CaNAβ含量
2.9 western blot测定心肌细胞ALDH2、CaNAβ、NFAT3蛋白表达
2.10 CCK-8 法检测各组心肌细胞活力
2.11羟脯胺酸试剂盒测定心肌细胞培养上清液羟脯胺酸含量
2.12 DHE荧光探针检测心肌细胞内氧化应激水平
2.13 统计学分析
实验结果
1原代心肌细胞培养光镜下形态
2原代心肌细胞免疫荧光鉴定结果
3 NFAT3抑制剂最佳使用浓度
4 不同处理组心肌细胞内钙离子浓度变化情况
5酶联免疫吸附实验检测不同处理组心肌细胞内CaN含量
6 心肌细胞内CaNAβ含量
7 不同处理组心肌细胞ALDH2、CaNAβ、NFAT3蛋白表达
8 CCK-8 法检测各组心肌细胞活力
9 羟脯胺酸试剂盒测定心肌细胞培养上清液羟脯胺酸含量
10 各组心肌细胞内氧化应激水平
讨论
结论
参考文献
致谢
附录A 中英文缩略词对照
附录 B主要试剂配制
附录C 个人简历及论文发表情况
附录D文献综述:CaN/NFAT3信号通路与心血管疾病研究进展
