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籽粒苋粒蛋白和多酚物质的提取及性质研究

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文摘

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第一章 前言

1.1 籽粒苋概述

1.1.1 籽粒苋介绍

1.1.2 籽粒苋的特性

1.1.3 籽粒苋的应用

1.2 籽粒苋的研究现状

1.3 籽粒苋籽的成分分析

1.4 本课题的研究目的、意义及主要研究内容

1.4.1 研究目的、意义

1.4.2 实验的主要内容

第二章 实验设备、材料与分析方法

2.1 实验设备

2.2 实验材料

2.2.1 主要药品与试剂

2.2.2 实验所需试剂的准备

2.3 分析方法

2.3.1 蛋白含量的测定方法

2.3.2 还原糖含量的测定

2.3.3 淀粉浓度标准曲线的制定

2.3.4 淀粉酶抑制剂活性的测定方法

2.3.5 多酚含量的测定

2.3.6 抗氧化实验

2.3.7 高效液相色谱(HPLC)法

2.3.8 分子量的测定方法

第三章 籽粒苋蛋白的提取

3.1 标准曲线的制定

3.1.1 蛋白浓度标准曲线

3.1.2 葡萄糖标准曲线

3.1.3 淀粉浓度标准曲线

3.2 籽粒苋高蛋白粉的制作-双酶法

3.2.1 实验的主要工艺流程

3.2.2 单因素实验和正交实验

3.2.3 纤维素酶酶解反应的单因素实验和正交试验

3.2.4 α-淀粉酶酶解反应的单因素实验和正交试验

3.3 水溶性蛋白的提取

3.3.1 酸碱法提取籽粒苋蛋白单因素实验和正交试验

3.3.2 蛋白酶酶解法

3.4 方法比较

3.5 籽粒苋籽蛋白性质的研究

3.5.1 籽粒苋籽蛋白的氨基酸组成

3.5.2 必需氨基酸对比分析

3.5.3 淀粉酶抑制剂的研究

3.5.4 籽粒苋籽蛋白分子量的测定-电泳

第四章 籽粒苋籽多酚

4.1 籽粒苋籽多酚的提取及其性质的研究

4.1.1 多酚浓度标准曲线

4.1.2 单因素试验和正交试验

4.1.3 籽粒苋多酚抗氧化分析

4.2 籽粒苋籽粗提物的组分研究

4.2.1 GC-MS分析的样品制备

4.2.2 GC-MS对粗品进行分析的条件

4.2.3 结果与讨论

第五章 应用

5.1 一种双酶法制取籽粒苋高蛋白粉的方法

5.1.1 制取高蛋白粉步骤

5.1.2 产品特点分析

第六章 结论与展望

6.1 结论

6.1.1 蛋白质提取

6.1.2 多酚提取及其性质的研究

6.2 展望

参考文献:

论文、参加科研情况说明以及学位论文使用授权声明

致谢

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摘要

籽粒苋中含有丰富的蛋白质、脂肪、糖类、膳食纤维,其籽粒中的蛋白质含量和质量皆高于一般谷物,且氨基酸配比平衡,其蛋白质品质超过了大豆,接近于牛奶,并富含赖氨酸和人体必需脂肪酸,很适合人类营养需要。因此,将籽粒苋作为人类一种新的植物蛋白资源来开发利用具有广阔的前景。本实验以籽粒苋籽为原料,使用双酶法,酸碱法,蛋白酶水解法分别水解,以获得其中的蛋白质。该论文对三种提取工艺和籽粒苋高蛋白粉的制作方法进行了研究;并对籽粒苋籽中的多酚物质进行了提取工艺及其相关性质的研究。结果表明:
   ⑴双酶法,纤维素酶酶解反应的最佳条件是料液比为1:40,加酶量为20.78U/g(底物),酶解时间为3h;.α-淀粉酶酶解反应的最佳条件为:加酶量为6.6U/g(底物),酶解时间为2h,温度为55℃;此条件制得成品的蛋白质含量为28.56%,比原料中蛋白含量(15.03%)提高90.02%,产品的收得率达到82.7%。经氨基酸组成分析,检出17种氨基酸,其中赖氨酸含量占3.60%。
   ⑵酸碱法,最佳提取条件为pH=8,料液比1:20,温度25℃,提取时间0.5h为最佳提取条件。按照此条件得到的提取物,收得率为7.53%,产品中蛋白质含量为48%,经氨基酸组成分析,检出17种氨基酸,其中赖氨酸占1.70~2.84%。
   ⑶分别使用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅱ对籽粒苋蛋白进行水解,以获得水溶性蛋白。以木瓜蛋白酶为最佳,其水解条件为:温度50℃,料液比1:25,加酶量800U/g(底物),时间1.5h,收得率为4.45%,赖氨酸含量为7.76%。其次为中性蛋白酶I,水解条件为:温度45℃,料液比1:25,加酶量580U/g(底物),时间1.5h,收得率为4.25%,赖氨酸含量为1%;而中性蛋白酶Ⅱ水解效果稍差。三种酶水解效果木瓜蛋白酶和中性蛋白酶Ⅰ的蛋白质得率较好,木瓜蛋白酶水解产物中赖氨酸含量最高。
   ⑷籽粒苋籽多酚提取实验结果表明:以去离子水为提取溶剂,料液比为1:30,并在55℃水浴条件下超声波辅助提取105min,在此条件下12g籽粒苋粉,可得到多酚提取物33.491mg,收得率为0.279%。抗氧化性试验结果表明,籽粒苋籽多酚的浓度为10μg/ml时,对DPPH·的清除率为52.45%;当多酚浓度为60μg/ml时,对O2-·的清除率为65.34%;当浓度为100mg/ml时,对·OH的清除率为86.29%。其中对·OH的清除率在20~100ug/mL范围内要比Vc高,约是Vc的4~5倍。

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