三门湾黑斑口虾蛄遗传多样性的初步研究

摘要

黑斑口虾蛄（Oratosquilla kempi）俗称虾钩弹，虾拔弹，隶属节肢动物门（Arthropoda）、甲壳纲（Crustacea）、口足目（Stomatopoda）、虾蛄科（Squilladae）、口虾蛄属（Oratosquilla），在我国浙江省东南沿海及东南亚各国皆有分布，其肉味鲜美，营养丰富，经济价值高，是一种很有开发前途的海产甲壳类。本文用同工酶技术、RAPD技术和AFLP技术分析了三门湾黑斑口虾蛄的遗传多样性，以期为黑斑口虾蛄种质资源的研究奠定基础。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）方法，对黑斑口虾蛄的LDH、MDH、MEP、EST、ADH、GDH、GLDH、AMY、POD和SDH等10种同工酶进行了群体生化遗传分析，共检测了29个基因座。其中，Ldh-1(alleles，100，120)、Adh-1(alleles，100，105)、Sdh-1(alleles，100，110)、Sdh-2(alleles，100，110)、Est-2(alleles，100，105)、Mdh-2(alleles，90，100)、Mep-3(alleles，95，100，110)、Mep-4（alleles，100，105，110，115）、Gldh(alleles，90，100)、Gdh(alleles，100，110)和Amy-4(alleles，100，105)等11个基因座表现为多态，其多态基因座比例为37.93﹪，平均杂合度为0.1470，有杂合子缺失现象出现。 采用RAPD技术对19尾黑斑口虾蛄进行了基因组DNA的多态性分析。用22个随机引物，共检测出124个基因座，其中多态基因座为97个，占78.23﹪；个体间的平均遗传相似系数为0.776，遗传距离（遗传变异度）为0.224。 采用AFLP技术，对20尾黑斑口虾蛄的遗传多样性进行了研究，分析了黑斑口虾蛄的群体遗传结构。用内切酶EcoRⅠ/MseⅠ酶切组合，22个引物组合共记录了273条清晰的电泳条带，其中多态性条带为170条，多态基因座比例为62.27﹪。黑斑口虾蛄20尾个体间的遗传相似系数为0.767～0.957，平均遗传相似系数为0.832，平均杂合度为0.4222，高于同工酶电泳检测的杂合度值（0.1470），表明AFLP能检测出更多的杂合度，能提供更多的多态性信息。结果表明，AFLP技术用于黑斑口虾蛄的遗传多样性检测是切实可行的。 同工酶技术、RAPD技术和AFLP技术分析的结果显示，三门湾黑斑口虾蛄的遗传变异现象比较普遍，黑斑口虾蛄的遗传多样性状况良好，在开发利用的过程中应加以合理保护，以保持黑斑口虾蛄资源的可持续发展。同时，将上述三种技术结合起来，分别从DNA和蛋白质水平对黑斑口虾蛄的遗传多样性进行评估是现阶段分析黑斑口虾蛄遗传多样性的一种有效方法。