米诺环素对糖尿病大鼠视网膜病变抑制作用的研究

摘要

建立1型和2型大鼠糖尿病视网膜病变模型；从基因和蛋白水平，比较正常和糖尿病及不同浓度、时间米诺环素治疗后大鼠视网膜环氧化酶-2(COX-2)表达的差异，观察及研究米诺环素治疗的最佳浓度、时间；比较正常和糖尿病及米诺环素治疗后大鼠视网膜白细胞介素-1β(IL-1 β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的差异，分析与研究糖尿病视网膜微环境改变的分子机制，探讨糖尿病视网膜病变(DR)发生、发展的可能原因，为DR防治提供新的思路。 方法 给Wistar大鼠灌胃脂肪乳10D，记录饮食、饮水、体重变化，用毛细血管法和正糖钳技术判定胰岛素抗性。同时测定血清中空腹血糖、丙二醛(MDA)和游离脂肪酸(FFA)，四氧嘧啶大鼠腹腔注射；用实时荧光定量PCR技术和免疫组织化学染色的方法比较正常和糖尿病及米诺环素治疗7D、10D和14D后大鼠视网膜COX-2表达的差异；用实时荧光定量PCR技术和免疫组织化学染色的方法比较正常和糖尿病及米诺环素治疗后3W、5W、7W和9W大鼠视网膜IL-1 β、TNF-α、iNOS表达的差异。 结果 (1)通过四氧嘧啶一次腹腔注射建立了wistar大鼠1型糖尿病的动物模型。通过灌胃脂肪乳建立了伴有胰岛素抵抗的wistar大鼠2型糖尿病的动物模型。(2)糖尿病大鼠视网膜COX-2的表达均高于正常对照组，并随时间的延长而增加，有显著性的差异(P<0.05)，其蛋白水平与基因水平的表达相一致。(3)糖尿病大鼠视网膜COX-2的表达与糖尿病类型无关。(4)米诺环素浓度为22.5mg／kg和45mg／kg作用10天及14天均可抑制糖尿病大鼠COX-2的表达，有统计学意义(P<0.05)，其蛋白水平与基因水平的表达基本一致，且与糖尿病类型无关。(5)米诺环素浓度为22.5mg／kg作用14天较为理想。(6)各时间点(3w，5W，7w，9w)的糖尿病大鼠视网膜IL-1β、INF-α、iNOS的表达均高于正常对照组，并随时间的延长而增加，均有显著性的差异(P

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缩略词表

前言

第一部分 大鼠糖尿病视网膜病变模型的建立

第二部分 米诺环素对糖尿病大鼠视网膜COX-2表达的抑制作用

第三部分 米诺环素对糖尿病大鼠视网膜IL-1β、TNF-a、iNOS表达的抑制作用

综述一 糖尿病视网膜病变动物模型的研究进展

综述二 视网膜小胶质细胞的研究进展

致 谢