内源性一氧化碳参与中枢性呼吸调控的离体实验研究

摘要

本文旨在探讨内源性一氧化碳(carbon monoxide，CO)是否参与呼吸活动的中枢性调控。实验采用新生Sprague-Dawley大鼠，制备离体延髓脑片标本，采用电生理学技术，探讨内源性CO在中枢性呼吸调控中的作用。 以舌下神经根节律性自发放电为节律性呼吸活动的指标，分别用血红素氧合酶(beme oxygenase，HO)抑制剂ZnPP-9、CO和HO底物高铁血红素(hemin)灌流延髓脑片，观察舌下神经根呼吸样传出放电活动的变化。 实验分为5个组(n=8/组)：单纯人工脑脊液(artificial cerebrospinalfluid,ACSF)对照组、ZnPP-9组、外源性CO组、Hemin组和ZnPP-9+IIemin组，观察舌下神经根节律性放电的放电时程(burst duration，BD)、放电间期(burst interval，BI)、放电频率(burst frequency，BF)和积分幅度(integrated amplitude，IA)的变化。结果如下：在ZnPP-9组，与给药前相比，BD缩短、BI缩短、BF增加、IA降低(P<0.05)。在外源性CO组，与给药前相比，BD缩短、BI延长、BF降低、IA增大(P<0.05)。在Hemin组，与给药前相比，BI缩短、BF加快、IA降低(P<0.05)，BD无明显改变(P>0.05)。在ZnPP-9+Hemin组，与给药前相比，BI缩短、BF加快(P<0.05)，BD和IA无明显改变(P>0.05)。ZnPP-9+Hemin组与ZnPP-9组相比或ZnPP-9+Hemin组与Hemin组相比，BD、BI、BF和IA均无显著差异(P>0.05)。上述结果表明，内源性CO在节律性呼吸活动的中枢性调控中具有重要作用。 在停止hemin灌流并恢复单纯ACSF灌流后，hemin的作用并未消失，其原因可能是hemin未被洗脱。因此我们以相对吸光度为指标，对脑片hemin进行相对含量测定，观察脑片是否残留有hemin。 实验分为4个组(n=6/组)：空白对照组、单纯ACSF对照组、经洗脱Hemin组(Heminl组)和未经洗脱Hemin组(Hemin2组)。结果如下：空白对照组和单纯ACSF对照组脑片hemin的相对吸光度无显著性差异(p>0.05)；Heminl组和Hemin2组脑片hemin的相对吸光度显著高于空白对照组和单纯ACSF对照组(P<0.01)；Heminl组和Hemin2组脑片hemin的相对吸光度无显著性差异(P>0.05)。 上述结果表明，hemin的作用未消失是因为hemin未被洗脱。

目录

论文说明：缩略词表

声明

摘要

前言

材料与方法

一、主要仪器

二、主要试剂

三、溶液配制

四、实验动物

五、延髓脑片的制备

六、电生理实验

(一)实验分组

(二)实验装置的连接

(三)数据记录

七、分光光度测定

(一)实验分组

(二)分光光度测定

八、数据分析

结果

一、电生理实验结果

(一)单纯ACSF对照组舌下神经根放电情况

(二)ZnPP-9对舌下神经根放电的影响

(三)外源性CO对舌下神经根放电的影响

(四)Hemin对舌下神经根放电的影响

(五)ZnPP-9和Hemin联合使用对舌下神经根放电的影响

二、分光光度测定结果

讨论

小结

参考文献

文献综述：内源性一氧化碳在化学感受性呼吸调节中的作用

个人简历

致谢