组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）对坐骨神经血-神经屏障损伤后修复及巨噬细胞表型的影响

摘要

组织型纤溶酶原激活剂(t．PA)是丝氨酸蛋白酶家族的一员，其主要的生物学功能是激活纤溶酶原(Plasminogen，Plg)转变为纤溶酶(Plasmin，P1m)，后者可以降解血栓中的纤维蛋白，用于治疗急性心肌梗塞等血栓性疾病。近年来的研究发现t-PA在外周神经系统损伤的恢复过程中也发挥了重要的作用。在这些研究过程中发现巨噬细胞在神经损伤后的修复过程中同样发挥了重要的作用。而t-PA对巨噬细胞的功能是否有影响，至今尚未有全面的报导。 本文首先观察到脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS)体外刺激野生型小鼠腹腔巨噬细胞4h后，t-PAmRNA水平增高30倍以上，提示t-PA对巨噬细胞的功能起着一定的作用，因此我们利用野生型小鼠与t-PA基因敲除纯合子小鼠，腹腔取巨噬细胞观察t-PA基因缺失对巨噬细胞的吞噬功能，递呈抗原功能，迁移功能及分泌细胞因子功能的影响。 巨噬细胞吞噬功能方面，t-PA基因敲除纯合子小鼠巨噬细胞吞噬酵母及大肠杆菌Escherichiacoli的功能较野生型小鼠巨噬细胞增强。可诱导型一氧化氮合成酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)与巨噬细胞吞噬杀菌功能成正相关，在t-PA基因敲除小鼠巨噬细胞内iNOSmRNA水平较野生型小鼠巨噬细胞高；而精氨酸酶(arginase)与巨噬细胞吞噬杀菌功能成负相关的，在t-PA基因敲除纯合子小鼠巨噬细胞内arginasemRNA水平较野生型小鼠巨噬细胞低。提示与t-PA基因敲除纯合子小鼠巨噬细胞增强的吞噬功能有关。 巨噬细胞递呈抗原功能方面，本文测定了与提呈抗原相关的MHC口类分子H-2K、H-2D，MHC口类分子I—A，及辅助分子CD86的蛋白表达情况。我们发现t-PA基因敲除小鼠巨噬细胞膜表面分子H-2K表达下调，提示t-PA基因敲除小鼠巨噬细胞提呈抗原功能有所下降。 巨噬细胞迁移功能方面，结果显示t-PA基因敲除小鼠巨噬细胞在24小时内迁移出matrigel的数量明显要少于野生型小鼠组。进一步的研究显示，t-PA基因敲除纯合子小鼠巨噬细胞MMP-9的mRNA水平较野生型小鼠下调，提示t-PA基因敲除小鼠巨噬细胞迁移功能下降与MMP-9的表达下调有关。 巨噬细胞分泌细胞因子功能方面，我们利用LPS体外刺激巨噬细胞分泌细胞因子，并且利用real-timePCR检测t-PA基因缺失对巨噬细胞合成细胞因子IL-6、lL—12、TNFα及MIP．1BmRNA水平的影响。结果显示t-PA基因敲除小鼠巨噬细胞合成细胞因子mRNA水平较野生型小鼠高。体内实验进一步证实了上述实验结果。提示t．PA在调节巨噬细胞分泌细胞因子方面起着负性调节作用。 因此认为t．PA基因缺失可增强巨噬细胞的吞噬功能及分泌细胞因子功能，而提呈抗原功能及迁移功能则下降。反映了小鼠纤溶系统和免疫系统之间的作用存在着紧密的联系。

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英文缩略词表

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)对坐骨神经血-神经屏障损伤后修复的影响

摘要

前 言

实验材料与方法

实验结果

讨 论

参考文献

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)基因缺失对巨噬细胞表型的影响

摘要

前 言

实验材料和方法

实验结果

讨论

参考文献

综述 组织型纤溶酶原激活剂潜在的中枢神经系统毒性作用

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