铅暴露对猪免疫系统损伤作用研究

摘要

目的：铅作为环境中重要的重金属污染物，危害人类健康，且对机体损伤呈多系统性、多器官性。免疫系统作为人体抵御外来病害入侵的保护系统，一旦受到损伤，机体将很容易罹患感染从而诱发其他器官组织受损，甚至诱发肿瘤。因而环境中重金属污染物免疫毒性应该作为重要的研究对象。前期很多学者研究了铅对啮齿类大鼠、小鼠所产生的免疫毒性，但啮齿类动物与人类差异巨大，亲缘关系较远，仅仅有啮齿类动物试验研究结果并不能很好的反应铅可能对人体所造成损伤的程度。本试验使用与人类亲缘关系更近的猪作为试验动物，研究铅的免疫毒性，为研究铅可能对人体免疫系统造成的损伤提供进一步的理论支持。 方法：将24头大约克商品仔猪随机分为4组，用正常饲料和分别添加5mg/kg(低剂量组)，15mg/kg(中剂量组)，45mg/kg(高剂量组，均按含铅量计)醋酸铅的饲料对其进行90d攻毒饲养试验，饲养结束后屠宰，取其心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、猪毛、猪皮、脂肪、猪血、骨髓、猪耳、猪舌、猪尾、里脊，微波消解．原子吸收法测定其中的铅含量。采集猪脾脏，测定脾脏指数并制作病理切片HE染色观察脾脏病理变化，分光光度计测定脾脏中SOD，CAT，MDA，GSH-PX 含量。使用血液分析仪测定猪全血血常规指标，生化分析仪测定血清中免疫球蛋白(IgM，IgG，IgA)和补体(C3，C4)含量，并使用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测血液中T淋巴细胞的活力。 结果：随着饲料中铅含量的升高，猪体内各组织器官中的铅含量均有不同程度的升高。对照组猪各组织器官中铅含量由高到低的次序依次为肾脏＞脾脏＞肝脏＞毛发＞其他组织器官；3个给铅组猪各组织器官中铅含量由高到低的次序依次为骨髓＞肾脏＞脾脏＞肝脏＞毛发＞猪尾＞其他组织器官，作为免疫器官的脾脏铅含量较高。各组猪之间体重、组脾脏系数差异不显著(P＞0.05)。脾脏脂质过氧化指标显示，各组猪脾脏中SOD，CAT，MDA含量差异不显著(P＞0.05)，高剂量组与对照组相比GSH-PX活力降低30.2％差异显著(P＜0.05)。血常规指标测定结果表明，中剂量组、高剂量组与对照组相比红细胞数量分别减少16.5％，18.2％(P＜0.05)，高剂量组与对照组相比血红蛋白含量降低18.5％(P＜0.05)，3个给铅组血小板数量与对照组相比差异均没有显著差异(P＞0.05)，高剂量组与对照组相比白细胞数量降低38.1％(P＜0.05)。T淋巴细胞活力测定结果表明3个攻毒组T淋巴细胞活力与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05)。血清中免疫球蛋白含量分析结果表明，IgG含量高剂量组与对照组相比降低47.7％(p＜0.05)。IgM含量高剂量组与对照组相比降低37.1％(p＜0.05)。IgA含量中剂量组、高剂量组与对照组相比分别降低25.5％，28.8％(p＜0.05)。血清中补体含量分析结果表明，C3含量高剂量组与对照组相比降低50.0％差异达到显著水平(p＜0.05)，C4含量3个给铅组与对照组相比差异均没有显著差异(p＞0.05)。 结论：铅在猪体内主要分布于骨髓、肾脏、脾脏、肝脏、毛发中，其中作为免疫器官的脾脏中铅分布量较高；饲料中添加铅45mg/kg并不能导致猪生长明显受到抑制；饲料中铅含量达到45mg/kg可以造成猪血红蛋白含量显著降低，诱发贫血；脾脏切片，脾脏脂质过氧化指标测定结果表明，饲料中添加铅45mg/kg可引起个别脂质过氧化酶含量降低，且导致脾脏出血；白细胞数量，T淋巴细胞活力测定结果表明，饲料中铅含量达到5mg/kg时可造成猪免疫数量减少，当铅含量达到45mg/kg时细胞免疫功能显著降低；免疫球蛋白、补体含量测定表明饲料中铅含量为15mg/kg时，一些体液免疫水平指标开始降低，当饲料中铅含量上升到45mg/kg时，猪机体体液免疫能力指标全面下降，体液免疫功能受到抑制。

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第一章文献综述

1.1铅的吸收代谢及毒性危害

1.1.1铅在动物体内的吸收、分布和排泄

1.1.2铅的毒性效应

1.2猪作为新型试验动物模型受到重视

1.3本试验的研究目的和意义

第二章铅在猪免疫器官中分布情况研究

2.1材料和方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果

2.2.1饲料中铅含量情况

2.2.2铅在猪免疫器官器官和其他组织器官中的分布

2.3讨论

2.4 小结

第三章铅暴露对猪脾脏结构功能的影响

3.1材料与方法

3.1.1主要仪器试剂

3.1.2方法

3.2结果与分析

3.2.1铅染毒对猪体重增长变化影响

3.2.2铅染毒对猪脾脏指数的影响

3.2.3脾脏病理切片观察结果

3.2.4铅染毒对猪脾脏脂质过氧化指标的影响

3.3 讨论

3.3.1铅染毒对猪体重增长变化的影响

3.3.2铅染毒对猪脾脏的影响

3.3.3铅染毒对猪脾脏脂质过氧化的影响

3.4小结

第四章铅暴露对猪免疫功能的影响

4.1材料与方法

4.1.1主要仪器试剂

4.1.2方法

4.2结果与分析

4.2.1铅染毒对猪血常规指标的影响

4.2.2铅对猪血液中T淋巴细胞活力的影响

4.2.3铅对猪血清中免疫球蛋白含量的影响

4.2.4铅对猪血清中补体含量的影响

4.3讨论

4.3.1铅染毒对猪血液中白细胞数量和其他血常规指标的影响

4.3.2铅对猪血液中T淋巴细胞活力的影响

4.3.3铅对猪血液中免疫球蛋白含量的影响

4.3.4铅对猪血液中补体含量的影响

4.4小结

结 论

参考文献

致谢

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