蒙山九州虫草的化学成分和生物活性物质的研究

摘要

虫草属[Cordyceps(Fr.)Link]真菌是一大类形态特殊的昆虫病原真菌，仅清水大典就已记载316种。亦有报道，虫草属真菌迄今有记载达350余种。绝大多数为虫生真菌，在我国分布有70多种，是药用真菌的重要来源，以我国传统名贵药材一冬虫夏草最负盛名。但天然资源已告枯竭。我们在研究冬虫夏草换代产品的过程中，于1996年在山东蒙山发现了一种寄主为豆天蛾(ClanisbilineataWalker)幼虫的野生虫草，经中国科学院微生物研究所郭英兰先生鉴定为蒙山九州虫草(Cordyceps kyushuensis Kobayasi)(以下简称蒙山虫草)，无性型为九州轮枝霉菌(skyushuensis Verficillium Kyushue)，为一新种。经几年的努力，现已实现了蒙山虫草的人工小试栽培，为产业化生产奠定了基础。因此，有必要对蒙山虫草的药用价值及其作用机理进行探讨，这将为新药源、新药材及有关创新性药物的发现与开发提供可能与指导。 本论文以蒙山虫草为材料，运用药物化学、分析化学、细胞生物学和分子生物学等综合技术，从药物作用的物质基础—化学成分的研究入手，建立国内外尚无报道的蒙山虫草的标准指纹图谱，进而探讨它的药效作用与药用价值。 主要研究内容和结果如下： ①蒙山虫草子座和菌丝体干粉中水分含量与蛹虫草子座和冬虫夏草菌丝体干粉中水分含量相近，分别为5.02％、5.44％、5.81％和5.66％；灰分的含量相差略大，分别为2.95％、7.46％、3.48％和4.94％。 蒙山虫草子座和菌丝体的蛋白质含量分别为16.23％和18.55％，均低于蛹虫草子座和冬虫夏草菌丝体的19.62[％]和49.34％。总糖的含量以九州虫草子座最高，为32.58％，其菌丝体的总糖含量为20.47％略低于蛹虫草子座的24.90％，均高于冬虫夏草菌丝体的10.28％。由此可见，蒙山虫草多糖含量高，使其与其它虫草(包括冬虫夏草)在生物活性方面具有可比性。蒙山虫草子座的粗脂肪含量为8.O％，略低于蛹虫草子座的10.5％，蒙山虫草菌丝体的粗脂肪含量为13.0[％]，明显高于冬虫夏草菌丝体的8.1％。而粗纤维的含量四者大体相当，分别为2.9％、3.2％、4.7％和2.7％。 ②蒙山虫草菌丝体和子座中含有丰富的甘露醇，在干菌粉中含量分别为10.84％和6.53％，冬虫夏草菌丝体和蛹虫草子座中甘露醇的含量分别为6.32％和7.80％。 ③测定结果表明蒙山虫草菌丝体含有16种氨基酸，不含色氨酸和丝氨酸，子座含有18种氨基酸，其氨基酸种类比菌丝体多，两者均以谷氨酸含量最高，菌丝体的必需氨基酸的含量高于子座的，分别为2.99％和2.38％，菌丝体必需氨基酸占氨基酸总量的66.93[％]，远高于子座的34.48[％]，而多数氨基酸的含量也以菌丝体略高，这些可能与菌丝体培养液中营养丰富有关，虫草菌营养生长阶段氨基酸比生殖生长阶段高应是正常现象。 ④运用毛细管电泳，首次确定了蒙山虫草的发酵液多糖和菌丝体多糖水解组分。多糖水解组分主要含有葡萄糖、甘露糖和半乳糖，另外还含有少量阿拉伯糖。其中含量高的葡萄糖、甘露糖和半乳糖的比例分别为：发酵液，葡萄糖：甘露糖：半乳糖=1：1.08：3.72；菌丝体，葡萄糖：甘露糖：半乳糖=1：0.72：0.99。 ⑤应用反相高效液相色谱系统测定蒙山虫草中的5'-核苷酸。在优化的色谱条件下对样品中六种5'-核苷酸进行分离，然后用紫外检测器对各个色谱峰进行分析鉴别，并用外标法定量得到准确可靠的定性定量分析结果。蒙山虫草中含有5'-UMP、5'-GMP、5'-IMP和5'-AMP四种核苷酸，含量分别为0.4975、0.0133、0.9832和0.0383gg/rag。 ⑥用超临界CO<,2>萃取技术提取蒙山虫草子座挥发油，共分离出50种化合物，鉴定了其中的44种。已鉴定化合物组分占总馏出组分的88％，占色谱总馏出峰面积的98.2％。在子座挥发油已鉴定的组分中，含量最高的组分是亚油酸，相对含量58.44％，其次为棕榈酸，相对含量20.69％。相对含量较高的还有油酸(6.82％)、硬脂酸(3.36％)、十七烷酸即珍珠酸(1.72％)、十六碳烯酸即棕榈油酸(1.18％)、十五烷酸(1.00％)、反油酸(0.83％)等。 ⑦运用毛细管电泳、高效液相色谱系统和超临界CO<,2>萃取技术对蒙山虫草多糖、5’-核苷酸与挥发油组分及含量进行了测定，为蒙山虫草药用价值研发提供了依据。

目录

文摘

英文文摘

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第一章前言

第二章蒙山虫草子座、菌丝体的营养成分的测定

第三章蒙山虫草菌丝体及发酵液多糖的水解液组分的高效毛细管电泳分析

第四章蒙山九州虫草核苷酸类成分的高效液相色谱分析

第五章蒙山虫草子座超临界CO2萃取物的GC-MS分析

总结与展望

参考文献