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蒙山九州虫草药用价值及其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机理研究

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第一章绪论

一、虫草及其药用价值

1虫草简介

2虫草的化学成分

3虫草的药理作用与应用

二、天然药物的抗肿瘤作用机理

三、细胞凋亡与肿瘤的发生与治疗

1细胞凋亡的概念及其形态学特点

2细胞凋亡的分子机制

3细胞凋亡与肿瘤的发生

4细胞凋亡与肿瘤的治疗

四、本研究的内容、目的和意义

参考文献

第二章蒙山虫草化学成分及其指纹图谱初步研究

一、蒙山虫草化学成分的预实验

(一)样品与试剂

(二)样品提取液的制备

(三)方法与结果

二、蒙山虫草的核苷类成分的毛细管电泳研究

(一)材料与方法

(二)结果

三、蒙山虫草的氨基酸成分研究

1材料与仪器

2分析方法

3结果

四、蒙山虫草指纹图谱研究

(一)蒙山虫草的红外光谱指纹图谱

(二)蒙山虫草的核磁共振指纹图谱

(三)蒙山虫草的毛细管电泳指纹图谱

五、讨论

第三章蒙山九州虫草的初步药效学研究

一、蒙山九州虫草的抗氧化作用

(一)实验材料与仪器

(二)方法与原理

(三)结果

二、蒙山九州虫草三种提取物的体外抑瘤作用

(一)材料和方法

三、讨论

第四章蒙山虫草水提物和虫草素诱导人肿瘤细胞凋亡及其分子机理研究

一、材料与方法

1实验材料

2实验方法

二、结果

1蒙山九州虫草对U937和K562细胞增殖的影响

2蒙山九州虫草水提物和虫草素作用后U937和K562细胞的形态学变化

3蒙山九州虫草和虫草素作用后U937细胞超微结构的变化

4蒙山九州虫草和虫草素处理后U937细胞DNA和RNA的变化

5蒙山九州虫草水提物和虫草素作用后U937细胞DNA片段化电泳

6蒙山九州虫草水提物和虫草素作用后U937和K562细胞凋亡细胞率

7蒙山九州虫草和虫草素作用后U937细胞bcl-2、c-myc和c-fos蛋白表达水平的变化

8蒙山九州虫草和虫草素作用后U937细胞bcl-2及c-myc mRNA表达水平的变化

9蒙山九州虫草和虫草素诱导Caspase-3活性升高

10蒙山九州虫草和虫草素作用后U937细胞中Fas、FasL蛋白表达水平的变化

11蒙山九州虫草和虫草素作用后U937细胞中Ca2+浓度的变化

12蒙山九州虫草和虫草素处理后U937细胞线粒体膜电位的变化

三、讨论

1蒙山九州虫草和虫草素诱导肿瘤细胞凋亡的特征

2蒙山九州虫草和虫草素诱导肿瘤细胞凋亡的时间剂量效应关系

3蒙山九州虫草和虫草素诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制

4蒙山九州虫草和虫草素诱导肿瘤细胞凋亡信号传导

附图

第五章总结与设想

参考文献

攻读学位期间已发表和待发表的学术论文

致谢

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摘要

该研究以目前国内外有关研究尚无报道的蒙山九州虫草为研究材料,综合运用药物化学、分析化学、药理学、细胞生物学和分子生物学等方法和技术,旨在从药物作用的物质基础—化学成分的研究入手,建立蒙山虫草的标准指纹图谱,进而探讨它的药效作用与药用价值.在发现和确定了蒙山九州虫草抗氧化作用和对肿瘤细胞的体外抑瘤作用的基础,获得蒙山九州虫草提取物及虫草素诱导肿瘤细胞凋亡的多方面的确切证据,并由此进一步深入探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机理和信号传导途径.

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