瑞香狼毒总黄酮对实验性高脂血症大鼠降脂作用的研究

摘要

高脂血症是一种常见的发病率较高的代谢性疾病，是机体脂代谢异常所导致的血浆或血清脂质水平过高，是脂代谢紊乱的标志。它是导致人类心脑血管疾病、非酒精性脂肪肝、高血压、高血糖、肥胖症的元凶，其发病率逐年增长，在我国已经达到30％以上，是危害人类健康的头号杀手，因此，调节血脂水平、纠正脂代谢紊乱对防治心脑血管疾病具有重要意义。瑞香狼毒总黄酮作为植物药材黄酮类化合物的一种，同样具有多种生理功能，虽然很多研究表明，多种植物药材中黄酮类化合物具有降血脂和抗氧化作用，但是目前国内外对瑞香狼毒总黄酮降脂作用研究尚未见报道。本研究将瑞香狼毒总黄酮（TFSC)作用于高脂血症大鼠，来探讨瑞香狼毒总黄酮的降脂作用，研究结果为新型降血脂药物的开发提供参考依据，研究得到以下结果：
　　1.通过单因素试验和响应面法试验比较超声波辅助提取法和微波辅助提取法提取瑞香狼毒总黄酮的提取效果，试验结果表明，超声波辅助法比微波辅助法更适合于瑞香狼毒总黄酮的提取。超声辅助提取瑞香狼毒总黄酮的最佳工艺条件为:料液比1:30、乙醇浓度71%、超声波功率为300W、温度62℃、提取时间30min、提取3次，在此条件下总黄酮的提取率为5.16%，总黄酮纯度为27.5%。
　　2.以静态饱和吸附率和解吸率为考察指标，比较选取的9种大孔吸附树脂对瑞香狼毒总黄酮的纯化效果，试验结果表明，AB-8型树脂对瑞香狼毒总黄酮具有较好的吸附解吸性能，适用于对瑞香狼毒总黄酮的分离纯化。并进一步通过响应面法试验研究AB-8型大孔树脂纯化瑞香狼毒总黄酮的最佳工艺，得出最佳工艺条件为：上样浓度为2.0mg/mL，上样速率为2.0BV/h，洗脱剂乙醇浓度为70%，洗脱剂流速为2.0BV/h，洗脱剂乙醇体积为4.0BV，在此条件下分离纯化后，瑞香狼毒总黄酮纯度由原来的27.50%上升为58.24%，纯度提高了2.12倍，达到了分离、纯化的目的。
　　3.以高脂饲料喂养大鼠，每隔2周检测其体重、肝重、肝指数与血脂水平，观察肝脏病理切片，判断高脂血症模型形成情况。试验结果表明，4周高脂饮食成功地建立了高脂血症大鼠模型。
　　4.对灌胃TFSC治疗6周后高脂血症大鼠的体重、肝重、肝指数、血清和肝脏中的脂质指标、抗氧化指标以及粪便中脂肪、TC和TG进行了测定，并对大鼠肝脏中FAS、ACC、CYP7A1、CPT-I和PPAR-α基因的mRNA表达和SREBP-lc基因mRNA表达、蛋白表达进行检测，分析TFSC对高脂血症大鼠降脂作用的分子机制。试验结果表明，TFSC显著降低高脂血症大鼠体重、肝重和肝指数；显著降低大鼠血清TC、TG、LDL-C和AI、升高HDL-C，同时可以改善大鼠的血流变指标；显著提高大鼠血清、肝脏中T-SOD、GSH-Px活性，降低血清、肝脏中MDA含量；能够显著上调肝脏组织中脂质分解相关基因CYP7A1、CPT-I和PPAR-α的表达，下调脂质合成相关基因FAS、ACC和SREBP-lc的表达；对大鼠血清中GLU和FFA无明显作用。
　　全文研究表明，TFSC对高脂血症大鼠具有较好的降脂保肝、调节和改善机体自由基代谢平衡作用，其可能机制是通过TFSC下调转录因子SREBP-lc mRNA表达和蛋白表达，来调控下游脂质合成相关基因ACC和FAS的表达，同时TFSC通过上调转录因子PPAR-α基因表达，来调控下游脂质分解相关基因CPT-I和CYP7A1的表达，进而来增强肝脏组织的β氧化，促进体内脂肪酸的分解，抑制脂肪酸的合成、最终达到调节实验性高脂血症大鼠脂代谢的作用。

目录

缩 略 语 表

1 引言

1.1 瑞香狼毒概况

1.2 黄酮类化合物的研究概况

1.3 高脂血症及降脂药物研究进展

1.4 本论文研究内容和目的意义

第二章、瑞香狼毒总黄酮提取工艺的研究

2.1 试验材料

2.2 试验方法

2.3 结果与分析

2.4 讨论

2.5 小结

第三章、瑞香狼毒总黄酮纯化工艺的研究

3.1 试验材料

3.2 试验方法

3.3 结果与分析

3.4 讨论

3.5 小结

第四章、实验性高脂血症大鼠模型的建立

4.1 试验材料

4.2 试验方法

4.3 结果与分析

4.4 讨论

4.5 小结

第五章、瑞香狼毒总黄酮对实验性高脂血症大鼠的降脂作用研究

5.1 试验材料

5.2 试验方法

5.3 结果与分析

5.4 讨论

5.5 小结

6 总体结论

7 创新点

致谢

参考文献

作 者 简 介