家兔的Oddi括约肌功能异常模型制作及其组织内NOS和VIP变化的意义

摘要

围绕在胆总管壶腹和胆胰管末端的括约肌，统称为Oddi括约肌(sphincter of Oddi，SO)。正常情况下，SO在维持胆道压力、促进胆汁排泄以及防止十二指肠液和胰液返流方面起重要作用。目前，国内外学者已经认识到SO异常包括SO功能异常(sphincter of Oddi dysfunction，SOD)和SO解剖形态异常两个部分，前者可能不合并形态的异常变化，而后者可能在形态异常的基础上并没有表现出功能异常。但是，SO测压(sphincter 0f Oddi matlometry SOM)是公认的检测SO功能异常的金标准。我们采用多种手术方法制作SOD的模型，并应用SOM的方法观察实验组家兔模型的各项压力指标，同时与对照组的正常家兔压力指标比较，以便判断模型制作是否成功。此外，我们应用免疫组化链酶亲和素．过氧化物酶法(SABC法)观察各组家兔SO和十二指肠乳头中一氧化氮合酶(Nitric oxidesynthase，NOS)和血管活性肠肽(Vasoactive intestinal polypeptide，VIP)的变化，探讨VIP和一氧化氮(Nitric oxide，NO)在SOD发病机制中的作用。 材料： 1、分组方法 将77只成年家兔随机分为正常对照组8只、胆囊切除组12只、迷走神经干切断组8只、胆总管不完全结扎组11只、SO不完全结扎组9只、胆囊不完全结扎组9只、胆管注入胰酶组12只、SO注射酒精组8只，雄性40只，雌性37只。 2、仪器和药品 ①三通道测压管(长2米，外径1.7mm，3个侧孔径0.5mm，间隔2mm．)②PC polygram HR高分辨，多通道胃肠功能测定仪③低顺应性水灌注系统④20％氨基甲酸乙酯；95％酒精；动物胰酶制剂(粉剂)方法1、手术操作氨基甲酸乙酯(1.0g/kg)静脉注射麻醉，全部实验组均经腹中线开腹，且彻底止血后，行两层关腹。(1)对照组：仅行开关腹术；(2)胆囊切除组：结扎胆囊管和胆囊动脉，逆行切除胆囊；(3)迷走神经干切断组：于腹段食管两侧游离出左，右迷走神经干，用丝线将其悬吊，各切除约1cm的神经干；(4)胆总管不完全结扎组：于十二指肠乳头开口处对侧缘纵行切开十二指肠约1cm，将无菌硬膜外插管逆行插入胆总管，钝性分离胆总管周围组织，4＃丝线绕过胆总管，将胆总管结扎在硬膜外插管上，然后，拔出插管，缝合十二指肠切口；(5)SO不完全结扎组：如上述切开十二指肠，应用可吸收线横行缝扎乳头开口，观察仍有少量胆汁流出，缝合十二指肠切口；(6)胆囊不完全结扎组：牵拉肝脏于腹外，显露胆囊，缝合针带丝线绕过胆囊体中部，结扎闭合约50％横断面积；(7)胆管注入胰酶组：如上述切开十二指肠，将无菌硬膜外插管逆行插入胆总管，关闭十二指肠切口，并固定插管在肠壁上，缝合腹膜及腹肌，同时再次固定插管于腹肌上，钝性分离出一皮下隧道至家兔后颈部，插管沿道至后颈部切口，再次固定插管，关闭腹部外皮。将配制10％动物胰酶2ml自插管逆行注入胆总管，1hr和2hr后，分别再注入2ml胰酶，每次注入后均闭管10min；(8)SO注射酒精组：如上述切开十二指肠，乳头周围2mm内均匀四个点各注射95％酒精0.1ml，缝合十二指肠切口。对照组和实验组均于术前12hr和当日禁食不禁水，除胆管注入胰酶组于注完胰酶24hr后测压外，其余各组均于术后1周进行压力测定。 2、测压步骤 氨基甲酸乙酯(1.0g/kg)麻醉满意后，经原切口进腹腔，在十二指肠乳头开口的对侧缘，纵行切开十二指肠约1cm，暴露乳头。将高分辨，多通道胃肠功能测定仪接通三通道测压管，应用低顺应性水灌注系统，以十二指肠压力为曲线零点标定后，经乳头将测压管逆行插入胆总管。观察曲线，确定插入胆总管后，稳定30sec，进行测压3-5 min，然后逐渐撤拉导管达SO处，直视下并结合电脑显示曲线于高压力区处可确定测压管侧孔位于括约肌最佳位置。稳定30 sec后进行压力测定3-5min，记录压力曲线以待分析。 3、观察指标 SO基础压；SO收缩幅度；SO收缩频率；SO收缩间期；胆总管压力4、数据处理本实验计算的压力指标均为计量资料，计量数据以均数±标准差((-x)±s)表示。应用spss11.5统计分析软件，采用单因素方差分析的方法行各实验组与对照组比较。P<0.05为差异显著，P<0.01为差异非常显著。 结果： 1、胆囊切除组家兔SO功能变化SO基础压较对照组显著升高，平均为36.61±8.60mmHg(p<0.01)；2、迷走神经切断干组家兔SO功能变化SO基础压较对照组显著升高，平均为28.54±7.66mmHg(p<0.05)；3、胆总管不完全结扎组家兔S0功能变化SO基础压较对照组均显著升高，平均为28.45±7.02mmHg(p<0.05)；4、其余各组家兔SO各项压力指标较对照组均无显著变化。 结论： 家兔分别行胆囊切除、迷走神经干切断、胆总管不完全结扎处理后，可以引起SO运动功能改变。但是，仅是部分压力指标的变化。

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英文论著摘要

论文一 家兔的Oddi括约肌功能异常模型制作以及测压法检测模型的研究

前言

实验材料

实验方法

实验结果

论文二 家兔的Oddi括约肌等组织内NOS和VIP数量的变化及意义

前言

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 Oddi括约肌异常和胰腺炎关系的研究现状

在学期间科研成绩

致谢

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