CD40信号和TNF-α在单核细胞来源的树突状细胞表达趋化因子及其受体和相关功能中的作用研究

摘要

树突状细胞(DCs)是目前已知的机体内功能最强的专职性抗原提呈细胞(APC)，可以摄取、加工和处理各种抗原物质，并将抗原信息提呈给T细胞，有效地激发初始型T细胞，从而启动机体的免疫应答，而其它的APC则不具此特性。近年来DCs正受到越来越多的重视，被认为在介导固有免疫和适应性免疫应答中起着关键作用。 DCs具有异质性，由多种群体组成，根据其不同的前体来源，可以将DCs分为髓系和T淋巴系两大群体，目前用于制备肿瘤DCs疫苗的体内外实验和临床初步试验多采用髓系DCs，可以由CD34+造血细胞和外周血单核细胞诱导分化获得。骨髓中的DCs前体细胞在炎症因子的趋化下，由血液循环中迁移至外周非淋巴组织，成为未成熟的DCs，此时DCs具有很强的抗原摄取能力，能有效地俘获入侵的病原体，但一旦DCs提呈抗原后，就失去了加工提呈新抗原的能力，并上调共刺激分子和调节趋化因子受体的表达，迅速通过淋巴管的内皮细胞，经输入淋巴管引流迁移至次级淋巴器官，到达次级淋巴器官的T细胞区，DCs将抗原提呈给抗原特异性的T淋巴细胞，从而激活静息状态的T细胞，T细胞活化并迁移至病灶进一步发挥其生物学功能，这是一个相当复杂的过程。 自1987年发现第一个趋化因子——IL-8至今，已克隆出50多种趋化因子及21种趋化因子受体，趋化因子家族成为目前最大的细胞因子亚家族，趋化因子／趋化因子受体系统是DCs和T细胞游走的原动力。不同发育阶段与不同部位的DCs通过表达不同的趋化因子及其受体而表现出不同的趋化性，并受特定分布的趋化因子调控发生定向迁移。正是由于不同组织表达特定趋化因子对相应DCs受体的协调作用，不同类型的DCs群体才能完成精确的定向迁移。 近年来，随着DCs在免疫系统中的作用日益受到重视，各种与DCs相关的肿瘤疫苗也逐渐在恶性黑色素瘤、肾癌等肿瘤治疗中开始应用，并取得了一定的效果。树突状细胞疫苗是新一代的肿瘤疫苗，可提供更有效的特异性主动免疫，显示了其比“常规”疫苗的明显的优越性。虽然树突状细胞在机体淋巴组织、血液内含量极少，但随着树突状细胞的分离、鉴定、纯化、扩增技术的日臻完善，树突状细胞疫苗在抗肿瘤免疫中的应用也日新月异地发展起来。但要使DCs疫苗真正成为临床上的肿瘤疫苗，尚面临着其它许多的挑战，包括如何使DCs疫苗精确迁移至有效部位等都有待深入探索。另外潜在的自身免疫反应也是一个不容忽视的问题。因此DCs疫苗成为真正意义上的“肿瘤疫苗”尚任重道远，还需深入进行一些基础研究。 第一部分体外实验研究了CD40信号和TNF-ot在单核细胞来源的树突状细胞表达的趋化因子及其受体和相关功能：通过分离人新鲜外周血培养并获得CDl4+单核细胞来源的imDC，在体外与凋亡肿瘤细胞共育并联合激发型CD40单克隆抗体5C1l或TNF-a继续诱导培养获得mDC，并由mDC激活静息T细胞。FACS方法和Real-timePCR方法检测相关共刺激分子及趋化因子受体CXCR4和CCR7在DCs和CXCR3在T细胞上的表达，免疫组织化学方法和Real-timePCR方法检测不同发育阶段的Mo-DCs所表达的IP．10和DC-CKl，趋化实验检测不同发育阶段Mo-DCs上清对活化和静息T细胞的趋化能力。结果显示：(1)在Mo-DCs的分化发育过程中，从imDC到mDC，其共刺激分子CDl仅、CD80、CD83、CD86、HLA-DR的表达均明显升高(P

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研究背景

第一部分CD40信号和TNF-α在单核细胞来源的树突状细胞表达趋化因子及其受体和相关功能中的体外作用研究

第二部分CD40信号和TNF-α在单核细胞来源的树突状细胞表达趋化因子及其受体和相关功能中的体内作用研究

小结与展望

本研究所获的基金资助

研究生学习期间发表和完成的文章

4-1BB/4-1BBL在DCs和T细胞的共刺激作用中的研究进展

致谢