CTLA-4基因产物及CD154与自身免疫性甲状腺疾病的相关研究

摘要

目的：观察成人自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid disease，AITD)患者外周血T细胞上细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4，CD152)、CD154(CD40L)及血清可溶性细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(sCTLA-4)的表达的变化及其意义。
　　 方法：研究对象为Graves病(GD)患者43例(GD治疗前组23例，GD临床缓解患者20例)、Graves眼病(Graves ophthalmopathy，GO)患者12例(GO组)、桥本甲状腺炎(Hashimotos thyroiditis，HT)患者10例(HT组)和健康自愿者15例(正常对照组)。采用流式细胞技术测定外周血T细胞上共刺激分子CD152、CD154水平。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清sCTLA-4。化学发光法检测甲状腺功能及甲状腺自身抗体。多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验，两组间比较采用独立样本t检验，Mann-WhitneyU检验。两组相关分析采用Pearson或Spearman相关分析。
　　 结果：1、正常对照组，GD治疗前组、GD临床缓解组、GO组、HT组血清sCTLA-4水平表达及其变化：分别为0.877±1.143(ng/ml)，11.779±14.141(ng/ml)，8.588±10.614(ng/ml)，22.364±29.394(ng/ml)，7.848±8.713(ng/ml)。与正常对照组相比，其余四组的sCTLA-4水平均显著升高(P<0.01)；GD治疗前组和GD临床缓解组的差异无统计学意义(P>0.05)；GO组较GD治疗前组sCTLA-4水平升高(P<0.05)。
　　 2、正常对照组，GD治疗前组、GD临床缓解组、GO组、HT组CD3+CD152+T细胞、CD4+CD152+T细胞表达情况：其各组百分比分别为2.60±2.26和3.07±2.78，10.45±4.21和7.99±3.12，5.45±1.78和4.00±1.93，14.05±4.30和11.55±3.20，0.95±0.77和1.35±0.76。与对照组相比，GD治疗前组、GD临床缓解组、GO组中CD3+CD152+T细胞、CD4+CD152+T细胞的百分比均较高(P<0.05)。GD临床缓解组显著低于治疗前组(P<0.01)。HT组CD3+CD152+T细胞、CD4+CD152+T细胞的百分比较对照组低(P<0.05)。
　　 3、正常对照组、GD治疗前组、GD临床缓解组、GO组、HT组各组间CD4+CD154+T细胞水平表达：其百分比分别为30.59±12.96，27.09±7.89，29.50±14.26，29.45±15.49，24.78±14.41。各组分别与对照组或GD治疗前组相比CD4+CD154+T百分比差异无统计学意义(P>0.05)。
　　 4、在GD治疗前组、HT中CTLA-4基因产物、CD154与各组临床指标相关性比较：(1)、GD治疗前组、HT组中sCTLA-4、CD3+CD152+T细胞、CD4+CD152+T细胞、CD4+CD154+T细胞百分比与FT3、FT4、TSH、年龄之间无相关性(P>0.05)。
　　 (2)、GD治疗前组、HT组中男女组间及吸烟组与不吸烟组间sCTLA-4无统计学差异(P>0.05)。
　　 (3)、GD治疗前组中CD3+CD152+T细胞(r=0.447)、CD4+CD152+T细胞(r=424)百分比与TRAb成正相关(P<0.05)，sCTLA-4、CD4+CD154+与TPOAb、TGAb、TRAb之间均无明显相关(P<0.05)。
　　 (4)、HT组中CD3+CD152+T细胞(r=0.841)、CD4+CD152+T细胞(r=0.706)百分比与TGAb成负相关(P<0.05)，sCTLA-4、CD4+CD154+T细胞百分比与TPOAb、TGAb、TRAb之间均无明显相关(P>0.05)。
　　 结论：1、GD和HT组中sCTLA-4表达增多，推测sCTLA-4可能通过与共刺激分子B7的相互作用参与AITD发生发展过程。在两组中sCTLA-4与年龄、性别、吸烟、甲状腺激素、自身抗体及治疗均无相关性，推测sCTLA-4的水平为基因所决定，不受外界环境如吸烟、治疗等的影响，其参与AITD的过程可能与自身抗体的产生无关。
　　 2、GO组较GD组中sCTLA-4水平明显升高，推测其参与GO的发生、发展，可能可作为预示GO发生的一敏感指标。
　　 3、在AITD中CD3+CD152+T细胞、CD4+CD152+T细胞的表达异常，CD152的水平与甲状腺自身抗体相关，GD临床缓解组较GD治疗前组CD3+CD152+T细胞、C04+CD152+T细胞的表达显著降低。推测CD152可能通过自身抗体的产生在AITD中发挥重要的作用，而AITD的治疗可能具有免疫调节作用。
　　 4、各组分别与对照组、GD治疗前组相比CD4+CD154+T细胞百分比无统计学差异，CD4+CD154+T细胞百分比与FT3、FT4、TSH、年龄、TPOAb、TGAb、TRAb之间均无明显相关。CD154作为重要的共刺激分子配体在AITD中的作用有待进一步探讨。