FOXO3a基因多态性rs4946936与中国儿童急性淋巴细胞白血病发病风险的研究

摘要

目的：钗头蛋白3（FOXO3a）是细胞增殖和凋亡中重要的调节因子，而基因的3’UTR区域在转录后水平调控发挥重要作用，本实验探讨FOXO3a编码基因的3’UTR多态性rs4946936与中国人群中儿童急性淋巴细胞白血病（Acute Lymphoblastic Leukemia，ALL）易感性的关系。
　　方法：本病例-对照研究收集南京、上海及苏州ALL患儿外周血753例和对应地区健康儿童外周血1088例，通过调查问卷方法收集流行病学资料，用TaqMan探针法测定所有病例和对照多态性位点的基因型。分析不同基因型与儿童ALL发病风险的关系。功能实验包括实时定量PCR（real-time PCR, RT-PCR）、细胞培养、细胞转染及双荧光素酶报告基因实验。
　　结果：在环境危险因素暴露中，父母饮酒情况和家庭装修情况与儿童ALL的发病风险有显著相关性。病例对照关联性分析发现位于FOXO3a基因3’UTR的多态性rs4946936与儿童ALL发病风险显著相关。功能实验显示相较于C等位基因，携带T等位基因的骨髓FOXO3a mRNA呈现高表达水平，且该点突变导致miRNA-223与之结合能力发生改变。
　　结论：Rs4946936基因多态性与儿童ALL的发病风险显著关联。

目录

前言

材料与方法

1主要试剂

2主要仪器

3实验方法

3.1 研究对象

3.2 流行病学资料采集

3.3 DNA提取

3.4 基因分型

3.5 骨髓采集及RNA提取

3.6 逆转录

3.7 real-time PCR

3.8 细胞培养

3.9细胞转染（Amaxa(R) Cell Line Nucleofector(R) Kit V，LONZA）

3.10 双荧光素酶报告基因实验（Promega）

4 统计学方法

结果

1 研究对象的人口学特征

2 FOXO3a rs4946936与儿童ALL发病风险的关联性分析

3 Rs4946936多态性与儿童ALL发病风险的分层分析

5 Rs4946936多态性与 FOXO3a mRNA水平的关系

6 基因多态性对转录活性的影响

讨论

结论

参考文献

综述:FOXO3a与白血病关系

英文缩略词

致谢