鸡马立克氏病Ⅰ+Ⅲ型(CVI988+FC126)双价冷冻疫苗的研制

摘要

为降低鸡群马立克氏病的发病率，提高马立克疫苗的免疫效果，在近五年的时间内，研制了鸡马立克氏病Ⅰ+Ⅲ型二价活疫苗（CVI988+FC126株）。本品系用鸡马立克氏病(MD)Ⅰ型毒株（CVI988/Rispens）和Ⅲ型毒株(FC126)分别接种于鸡胚成纤维细胞(CEF)培养后，经消化、收获离心沉淀细胞，按一定比例混合，加入适量的细胞冻存液而制成。每头份疫苗含CVI988/Rispens病毒＞2000PFU,FC126病毒＞1000PFU。
　　 对鸡马立克氏病Ⅰ＋Ⅲ型二价活疫苗（CVI988+FC126株）的CVI988种毒进行了免疫原性、安全性、纯净性等方面的试验，并对细胞和疫苗的生产工艺进行了一系列改进试验；对二价疫苗的保存期进行了检验，进行了一定规模的田间试验。在GMP车间试生产了五批中试产品，并在江苏一些地区盐城、徐州、镇江等地的不同品种（罗曼、伊莎等）鸡场进行了较大规模的区域试验，所有试验结果均符合新生物制品申报的要求，于2006年获得农业部颁发的新兽药证书。
　　 1.种毒的优化将原始CVI988种毒进行了鸡体回归，回归后的种毒免疫原性大大提高。CVI988和FC126种毒的纯净性和安全性检验均合格，可用做二价疫苗的生产种毒。
　　 2.生产工艺的改进
　　 用磁力消化法生产CEF细胞，可大大减少SPF鸡胚的使用量，提高单胚的产细胞数。
　　 SPG+5％肉汤+20ppm酚红稀释液适宜做为马立克双价冷冻疫苗的稀释液，此稀释液与进口稀释液效果相当，当PH在6.7-7.1时，对病毒的保存效果最好。
　　 3.田间试验
　　 用50000只左右三黄肉鸡和罗曼蛋鸡，其中一半鸡免疫二价苗，一半鸡免疫CVI988单苗，在相同条件下饲养，观察150天。使用CVI988+FC126双价疫苗的鸡群平均MD发病率为1.45％，而使用CVI988单苗的鸡群平均MD发病率为2.90％,结果表明双价疫苗的效果明显好于使用CVI988单苗。
　　 4.中间试制和区域试验
　　 在GMP车间试制了五批产品，每批9只转瓶，共生产约135万羽份二价疫苗，平均每转瓶可生产3万羽份疫苗，所有中试产品的安全性检验、效力检验、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验全部合格。
　　 在徐州、盐城、镇江等地进行了二价苗区域试验，试验鸡品种有伊莎、罗曼蛋鸡，数量约11万羽，这些鸡场近几年常发生马立克氏病，但使用二价苗后未发生一例马立克氏病，因此试验鸡场要求提供更多的疫苗使用。

目录

文摘

英文文摘

前言

第一篇 文献综述

参考文献

第二篇 实验研究

第一章 鸡马立克CVI988种毒回归和CVI988回归种毒鉴定

1 材料与方法

2 结果

3 结论

参考文献

REGRESSION OF MAREK'S DISEASE CVII988 VIRUS AND IDENTIFICATION OF REGRESSED VIRUS

第二章 鸡马立克氏病Ⅰ型CVI988/Rispens和Ⅲ型FC126毒种的支原体和外源致病因子检验

1 材料与方法

2 结果

3 结论

参考文献

MYCOPLASMA AND EXOGENOUS PATHOGENIC FACTORS TEST OF MD TYPE I CVI988/RISPENS VIRUS SEED AND TYPE Ⅲ FC126 VIRUS SEED

第三章 CVI988/Rispens+FC126双价冷冻疫苗的安全性试验

1 材料与方法

2 结果

3 结论

参考文献

THE SATETY TEST OF CVI988/RISPENS+FC126 LIVE BIVALENT VACCINE

第四章 马立克稀释液对鸡马立克氏病Ⅰ+Ⅲ型（CVI988/Rispens +FC126）双价冷冻疫苗病毒存活率的影响

1 材料与方法

2 结果

3 结论

参考文献

THE INFLUENCE OF DILUENT ON THE VIRUS LIVABILITY OF MAREK'S DISEASE Ⅰ+Ⅲ LIVE BIVALENT VACCINE (CVI988+FC126)

第五章 鸡马立克氏病Ⅰ+Ⅲ型(CVI988+FC126)双价冷冻疫苗保存期试验

1 材料与方法

2 结果

3 结论

参考文献

STORAGE LIFE TEST OF MAREK'S DISEASE Ⅰ+Ⅲ LIVE BIVALENT VACCINE (CVI988+FC126)

第六章 鸡胚成纤维细胞(CEF)制备和鸡马立克液氮疫苗生产工艺改进试验

1 材料与方法

2 结果

3 结论

参考文献

PROCESS STUDY ON PREPARATION OF CHICKEN EMBRYO FIBROBLAST CELLS AND PRODUCTION OF CHICKEN MAREK'S DISEASE LIQUID NITROGEN VACCINE

第七章 鸡马立克氏病Ⅰ+Ⅲ型(CVI988+FC126)双价冷冻疫苗中间试制

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

TRIAL PRODUCTION OF MAREK'S DISEASE Ⅰ+Ⅲ LIVE BIVALENT VACCINE (CVI988+FC126)

第八章 鸡马立克氏病Ⅰ+Ⅲ型(CVI988+FC126)双价冷冻疫苗田间免疫效力试验和区域试验

1 材料与方法

2 结果

3 结论

参考文献

FIELD AND AREA IMMUNITY TRAILS OF MAREK'S DISEASE Ⅰ+Ⅲ LIVE BIVALENT VACCINES (CVI988+FC126)

全文总结

致谢