α-鹅膏毒肽致小鼠肝细胞凋亡的实验研究

摘要

目的:研究α-鹅膏毒肽(α-amanitin AMA)是否对正常小鼠肝细胞存在致凋亡作用以及是否存在剂量和时间效应关系,初步探讨α-鹅膏毒肽致肝损害的机理.方法:4~6周龄健康雄性昆明小白鼠随机抽样分组,共2组:空白对照组(腹腔注射生理盐水)、实验组(腹腔注射AMA);实验组①根据注射AMA剂量不同分为3个剂量亚组:0.8mg/kg亚组、1.2mg/kg亚组、2.0mg/kg亚组,于注射后24小时观察;②AMA(2.0mg/kg)组根据注射后观察时间点不同分为3个时间亚组:16小时亚组、24小时亚组、36小时亚组.空白对照组和实验组的各亚组中每组5只小鼠,各组小鼠经上述处理后分批处死,取肝脏组织进行检测:肝组织切片HE染色光学显微镜和铀铅双重染色透射电镜观察肝细胞形态学改变;肝组织匀浆提取DNA琼脂糖凝胶电泳检测;末端脱氧核糖转移酶介导的dUTP生物素末端标记法(TUNEL)检测小鼠肝细胞凋亡的数量和凋亡指数(apoptotic index AI),采用SPSS11.0软件进行统计学处理.结论:一定剂量的α-鹅膏毒肽(AMA)能诱导小鼠肝细胞凋亡,并随着剂量和作用时间的增加其诱导肝细胞凋亡的数量增加,凋亡率亦显著增高.

目录

文摘

英文文摘

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英文缩写

第一章：前言

第二章：材料与方法

2.1主要实验仪器

2.2主要实验试剂

2.3实验对象和分组

2.3.1实验动物

2.3.2实验分组

2.4实验方法

2.4.1HE染色光学显微镜

2.4.2透射电子显微镜

2.4.3肝细胞DNA琼脂糖凝胶电泳

2.4.4 TUNEL法

2.5统计学的处理

第三章：结果

3.1形态学变化

3.1.1 HE染色光镜观察

3.1.2透射电镜观察

3.2琼脂糖凝胶电泳

3.3 TUNEL检测结果

3.4凋亡细胞数的统计分析

第四章：讨论

第五章：结论

参考文献

综述(一)

综述(二)

致谢

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