雷公藤内酯醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的治疗研究

摘要

目的：建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)Wistar大鼠模型，观察雷公藤内酯醇(Tri)能否治疗EAE，及其对EAE中枢神经系统炎症浸润细胞凋亡及凋亡相关蛋白NF-kBp65、Bcl-2、Bax的影响，为临床应用提供实验依据。 材料与方法： 1.采用四肢足掌皮内注射豚鼠全脊髓匀浆-完全福氏佐剂(GPSCH-CFA)，并辅以注射浓度为1×1011个菌体/ml或1×1010个菌体/ml的百日咳疫苗，诱导大鼠建立EAE模型。 2.将雌性大鼠随机分为对照组(CONTROL组)、模型组(EAE组)和腹腔注射雷公藤内酯醇治疗组(Tri组)，免疫后第11天Tri组腹腔注射雷公藤内酯醇(40μg/kg·d)，CONTROL组及EAE组给予等体积的生理盐水腹腔注射，第28天停止注射。观察各组的发病情况到第45天。 3.分组及给药方法同2，第17天处死，观察中枢神经系统炎症细胞浸润程度，3'末端脱氧核苷酸基(TdT)介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测浸润细胞凋亡情况，免疫组化检测浸润细胞NF-kBp65、Bcl-2、Bax蛋白的表达。 结果： 1.用四肢足掌皮内注射GPSCH-CFA诱导EAE，一般都在注射抗原11天后出现症状，在发病3-6天后临床症状达最高峰，脊髓组织出现明显的炎性病理变化及脱髓鞘。症状持续约12天左右恢复正常。且1×1011个菌体/ml的百日咳疫苗比1×1010个菌体/ml的百日咳疫苗能更有效地诱导EAE。 2.雷公藤内酯醇治疗组与EAE模型组比较，发病率较低，临床症状减轻。 3.雷公藤内酯醇治疗组与EAE模型组相比，其中枢神经系统炎症浸润细胞的数目较少，凋亡率增高，NF-kBp65及Bcl-2表达下降，Bax的表达无明显变化，Bcl-2/Bax的比值下降。 结论： 1.采用注射GPSCH-CFA，并辅以注射百日咳疫苗诱导EAE大鼠模型简单、经济、可靠，且1×1011个菌体/ml的百日咳疫苗比1×1010个菌体/ml的百日咳疫苗能更有效地诱导EAE。 2.腹腔注射雷公藤内酯醇40μg/kg·d的剂量可有效地治疗EAE。 3.雷公藤内酯醇可能通过抑制EAE中枢神经系统血管周围炎性浸润细胞NF-kBp65、Bcl-2的表达，降低Bcl-2/bax的比值，从而提高炎性浸润细胞的凋亡率，减少炎性浸润细胞数目，从而减轻EAE的病情，这可能是Tri治疗EAE的作用机制之一。

目录

英文缩略词表

前言

第一部分不同百日咳疫苗浓度对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型发病的影响

第二部分雷公藤内酯醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用

第三部分雷公藤内酯醇对EAE中枢神经系统炎症浸润细胞凋亡及NF-kBp65、Bcl-2、Bax的影响

结论

参考文献

致谢

论文综述T细胞凋亡与多发性硬化