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【6h】

固定化的β-半乳糖苷酶合成低聚半乳糖的研究

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第一章绪论

1低聚半乳糖

1.1功能性低聚糖

1.2 GOS的生理功能

1.3GOS的安全性

1.4GOS的物理化学性质

1.5GOS在食品等行业的应用

1.6低聚半乳糖的商业生产

2 GOS的酶法合成

2.1游离酶法合成GOS

2.2固定化酶法合成低聚糖

2.3固定化细胞合成GOS

3 β-半乳糖苷酶

3.1 β-半乳糖苷酶的来源

3.2酶本身特性

3.3 β-半乳糖苷酶的改造

3.4催化反应特性及GOS合成机理

3.5 β-半乳糖苷酶的应用

4固定化酶

4.1固定化酶的优缺点

4.2酶的固定化方法

5 β-半乳糖苷酶的固定化

5.1壳聚糖作载体

5.2海藻酸钠作载体

6课题的提出

第二章壳聚糖-戊二醛吸附交联法固定化β-半乳糖苷酶

1.材料与方法

1.1试验材料与试剂

1.2仪器与设备

1.3试验方法

2结果与讨论

2.1固定化和交联顺序的确定

2.2戊二醛pH值的确定

2.3戊二醛浓度对活力回收率的影响

2.4固定化时间对活力回收率的影响

2.5交联时间对活力回收率的影响

2.6加酶量对活力回收率的影响

2.7操作稳定性实验

3小结

第三章海藻酸钙凝胶包埋法固定化β-半乳糖苷酶

1.前言

2.材料与方法

2.1试验材料与试剂

2.2仪器与设备

2.3试验方法

3结果与讨论

3.1海藻酸钙凝胶包埋法固定化β-半乳糖苷酶条件优化

3.2固定化酶的特性表征

3.3用Box-Behnken设计提高操作稳定性

3.4新配方中加酶量对酶活力回收率的影响

3.5操作稳定性实验

3.6戊二醛交联防止酶泄漏

4.小结

第四章固定化酶合成低聚半乳糖

1.前言

2.材料与方法

2.1实验材料与试剂

2.2仪器与设备

2.3试验方法

3结果与讨论

3.1 HPLC法与TLC-苯酚浓硫酸法测定结果的比较

3.2固定化酶法合成GOS的条件优化

3.3用响应面法设计优化合成GOS的条件

3.4验证试验

3.5放大试验

4小结

结论

展望

致谢

参考文献

研究生期间发表的论文

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摘要

β-半乳糖苷酶可以利用乳糖合成低聚半乳糖(GOS),用作功能性食品配料.β-半乳糖苷酶固定化是工业化处理乳清,使其乳糖合成GOS的必要步骤.该论文研究β-半乳糖苷酶的固定化方法,以期获得性能良好的固定化酶,将其用于处理乳清合成GOS.该论文证实海藻酸钙-明胶凝胶包埋法可以制备活力回收率较高的固定化乳糖酶,并且具有较好的操作稳定性,该酶可以用于处理高浓度乳清,合成GOS,并具有进一步扩大试验的价值.

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