槐米中槲皮素的提取及其对高尿酸血症的影响

摘要

黄嘌呤氧化酶(Xianthine Oxidase，XO)能催化黄嘌呤和次黄嘌呤的氧化生成尿酸，尿酸在人体内的过度积累可引起高尿酸血症和痛风，因此对XO活性的抑制是预防或治疗痛风的一种有效手段。本论文通过小鼠体内和体外试验考察了多种黄酮类化合物对痛风和高尿酸血症的影响，确定预防和治疗效果较优的是槲皮素，并从槐米中提取纯化槲皮素，验证其对高尿酸学症小鼠的降尿酸作用。主要结论如下：
　　 1.九种具代表性的黄酮类化合物中部分表现出体外抑制XO的活性，活性最高的是槲皮索，其IC50为3.67μg/mL，其次为木犀草素(IC50=6.12μg/mL)和芹菜素(IC50=8.52μg/mL)。通过构效关系分析，黄酮类化合物的C3、C5和C7位上的羟基与C2-C3之间的双键对于抑制XO的活性具有同等重要的作用。动物试验表明槲皮素对高尿酸血症小鼠有降尿酸作用，其作用机理是槲皮素对XO的抑制作用扰乱了尿酸的生成途径。
　　 2.以槐米为原料，采用碱溶解酸沉淀法提取芦丁再经酸水解制备槲皮素，通过单因素试验和正交试验，确定槐米中槲皮素提取的最优工艺条件为：芦丁沉淀时pH为4，芦丁加酸水解时的比例为1:80(即1 g的芦丁用80 mL的2％H2SO4)，水解时间为2 h，经95％乙醇重结晶获得槲皮素。利用聚酰胺树脂柱层析进行纯化，纯化前后槲皮素的纯度分别为75.12％和90.89％。
　　 3.验证槐米提取物槲皮素对高尿酸血症小鼠的影响。利用槐米提取物体外抑制XO活力，其IC50为15.63μg/mL；不同剂量槐米提取物给小鼠灌胃一周，选择化学诱导剂氧嗪酸钾盐作为尿酸酶抑制剂，腹腔注射小鼠造成高尿酸血症模型。槐米提取物能通过有效抑制小鼠肝组织的XO活力显著地降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平，且对高尿酸血症小鼠的肾功能无损伤危害。
　　 槐米提取物对高尿酸血症小鼠具有降尿酸作用，且效果安全、明显。槐米提取物对预防和治疗痛风和高尿酸血症具有广阔的开发应用前景。