铜砷单一污染对赤子爱胜蚓体腔细胞的影响

摘要

本研究以人工土壤为介质并以蚯蚓作为土壤环境的指示动物，进行了铜与砷单一污染对蚯蚓本身、溶酶体以及参与防御反应体腔细胞的影响，从个体以及细胞水平对重金属的环境安全性提供依据。研究结果如下： 1.通过瑞氏染色的方法对蚯蚓的体腔细胞进行了分类。结果表明，蚯蚓的体腔细胞分为四类：组织黄细胞、嗜中性细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞。同时，尝试了用不同的方法提取蚯蚓体腔细胞，其中超声波法得到的细胞数量最多，可达到2.03×10<'6>个，但是细胞存活率很低；纤维针法得到的细胞成活率最高，可达到80.5％，但是细胞数量最少；电压刺激的方法简单快捷，是最常用的方法。 2.溶酶体作为生物标记物，利用铜与砷单一污染对蚯蚓进行诱导。正常条件下，中性红保持时间平均为94.3分钟。研究结果表明：诱导后，蚯蚓的生长率明显下降。中性红保持时间也缩短，而且当铜为800mg/Kg时，诱导14天后，甚至会降到0。中性红保持时间同重金属的浓度大小以及诱导时间密切相关。 3.对照中，体腔细胞吸收的结晶紫与中性红量分别为4.29微克与1.53微克。重金属作用后，蚯蚓体腔细胞的活性受到抑制，胞饮结晶紫与中性红的量随着重金属浓度的增加而不断减少，体腔细胞总数也受到重金属的影响，单位重量的细胞数目也逐渐减少。但是砷为10mg/kg时，诱导14天后，单位重量的细胞数量反而增加。这也说明，蚯蚓对重金属污染有一定的忍耐性。

目录

文摘

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第一章文献综述

第二章蚯蚓体腔细胞的提取与分类

2.1实验材料

2.2实验方法

2.2.1电压刺激制备体腔细胞

2.2.2超声波振荡制备细胞

2.2.3纤维针法

2.2.4细胞记数

2.2.5细胞的染色

2.2.6不同温度的诱导

2.3结果与分析

2.3.1蚯蚓体腔细胞的种类

2.3.2体腔细胞提取方法比较

2.3.3不同温度对蚯蚓体腔细胞的影响

2.4讨论与小结

第三章重金属对蚯蚓生长率的影响

3.1实验材料

3.2实验设计

3.3实验方法

3.4结果与分析

3.4.1铜对蚯蚓生长率的影响

3.4.2砷对蚯蚓生长率的影响

3.5讨论与小结

第四章重金属对溶酶体膜稳定性的影响

4.1实验材料

4.2实验方法

4.3结果与分析

4.3.1铜对溶酶体膜稳定性的影响

4.3.2砷对溶酶体膜稳定性的影响

4.4讨论与小结

第五章重金属对细胞吞饮作用与细胞黏附活性的影响

5.1实验材料

5.2实验方法

5.2.1体腔细胞的获得与处理

5.2.2细胞黏附活性

5.2.3吞饮能力

5.3结果与分析

5.3.1铜砷对细胞黏附活性的影响

5.3.2铜砷对体腔细胞吞饮活性的影响

5.4讨论与小结

第六章重金属对蚯蚓体腔细胞总数的影响

6.1实验材料

6.2研究方法

6.2.1体腔细胞的获得与处理

6.2.2细胞记数

6.3结果与分析

6.3.1铜对蚯蚓体腔细胞总数的影响

6.3.2砷对蚯蚓体腔细胞总数的影响

6.4讨论与小结

第七章实验的主要结论与研究展望

参考文献

致谢

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