血清铜、锌、铁匀相自动化检测技术的研究

摘要

目的:建立快速、灵敏的血清铜、锌、铁匀相自动化检测法。 方法:在表面活性剂存在下，分别用2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚(5-Br-PADAP)、2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-[(N，N-二羧基甲基)氨基]苯酚(5-Br-PADCAP)、2-(5-硝基-2-吡比啶偶氮)-5-[N-正丙基N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚(5-Nitro-PAPS)作显色剂匀相自动化法测定血清铜、锌、铁。通过对这些测定体系的水溶性、灵敏度、试剂成本等因素的考察，从中筛选出水溶性好、灵敏度高、试剂成本低、适合临床推广应用的匀相自动化分析法。 结果:以5-Br-PADAP匀相自动化分析法测定血清铜、锌、铁，线性范围分别为0-80μmol/L、0～80μmol/L、0～85μmol/L，平均回收率分别为100.7％、100.9％、99.7％，批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.015～0.020、0.019～0.023、0.014～0.016和0.023～0.030、0.025～0.030、0.016～0.025，与原子吸收分光光度法的线性回归方程和相关系数分别为Y=0.9987X-0.090(r=0.9803)、Y=1.001X-0.093(r=0.9948)、Y=0.9939X+0.117(r=0.9889)，健康人群的铜、锌、铁含量分别为11.44～21.92μmol/L、7.76～22.20μmol/L、9.22～29.62μmol/L。 以5-Br-PADCAP匀相自动化分析法测定血清铜、锌、铁，线性范围分别为0～65μmol/L、0～80μmol/L、0～140μmol/L，平均回收率分别为100.7％、100.3％、100.2％，批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.021～0.025、0.011～0.029、0.010～0.014和0.025～0.041、0.021～0.034、0.015～0.021，与原子吸收分光光度法的线性回归方程和相关系数分别为Y=1.0170X-0.367(r=0.9908)、Y=0.9917X-0.175(r=0.9968)、Y=0.9933X+0.256(r=0.9819)，健康人群的铜、锌、铁含量分别为11.03～21.57μmol/L、8.49～22.14μmol/L、9.42～29.86μmol/L。 以5-Nitro-PAPS匀相自动化分析法测定血清铜、锌、铁，线性范围分别为0～63μmol/L、0～71μmol/L、0～140μmol/L，平均回收率分别为100.7％、100.2％、99.2％，批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.021～0.033、0.019～0.024、0.024～0.035和0.027～0.038、0.031～0.035、0.029～0.037，与原子吸收分光光度法的线性回归方程和相关系数分别为Y=1.0100X-0.270(r=0.9982)、Y=0.9970X+0.170(r=0.9913)、Y=0.9920X+0.120，(r=0.9883)，健康人群的铜、锌、铁含量分别为9.70～24.10μmol/L、9.20～23.83μmol/L、11.20～28.40μmol/L。 结论:三种方法学的共同点：本研究所建立的血清铜、锌、铁5-Br-PADAP、5-Br-PADCAP、5-Nirto-PAPS匀相自动化分析法，均具有快速、简便、灵敏度高、选择性好等特点。 三种方法学的差异：5-Br-PADAP匀相自动分析法试剂来源方便，但其测定试剂水溶较差，对全自动生化分析仪的管道存在一定污染。5-Nirto-PAPS匀相自动分析法测定试剂灵敏度及水溶性均佳，对全自动生化分析仪不存在管道污染，但试剂价格昂贵、来源困难。和这两种方法相比，5-Br-PADCAP匀相自动分析法在具有较高测定灵敏度的同时，其测定试剂具有水溶性好、试剂成本低的优点，更适合在临床推广应用。

目录

前言

材料与方法

结果

1 5-Br-PADAP匀相自动分析法测定血清铜、锌、铁

2 5-Br-PADAP匀相自动分析法测定血清铜、锌、铁

3 5-Br-PADAP匀相自动分析法测定血清铜、锌、铁

分析和讨论

结论

参考文献

附录

致谢

生物样品中铜、锌、铁光度分析方法学进展

一、原子吸收分光光度法

二、可见分光光度法

三、催化动力学光度法

四、化学发光法

五、电感耦合高频等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）

参考文献