中药水提物对痤疮丙酸杆菌体外抑制作用及对兔耳痤疮模型的疗效研究

摘要

目的：分别提取十九种中药的水提物,观察其对痤疮丙酸杆菌标准株及临床株的体外抑制作用,从中筛选出对痤疮丙酸杆菌具有体外抑制作用的中药水提物,并将筛选出的药物外用于兔耳痤疮模型进行疗效及不良反应观察,从而为今后临床上痤疮的治疗提供一些新的可供选择的药物。方法：1.采集痤疮患者皮损内容物,37°C厌氧培养48小时后,采用耐氧实验、革兰氏染色镜检、触媒实验、硝酸盐实验、糖发酵实验等系列生化实验以及ANI厌氧菌鉴定卡,VITEK全自动微生物鉴定仪鉴定为痤疮丙酸杆菌。2.经查阅文献[3-4]后选择临床上使用频率较高的19种中药(黄柏、黄芩、大黄、金银花、苦参、连翘、地肤子、白头翁、百花蛇舌草、鱼腥草、马齿苋、旱莲草、紫草、板蓝根、大青叶、蒲公英、车前子、白芷、蛇床子)各 20g,分别加水浸泡、煎煮、过滤、浓缩配制成 20ml(相当于原药浓度1g/ml) 的中药水提物。3.配制含不同浓度的19种中药水提物的改良GAM培养平板,以琼脂稀释法检测各种药物的MIC,筛选出对痤疮丙酸杆菌有体外抑菌作用的中药水提物；同时检测临床上治疗痤疮常用的4种抗生素的 MIC,以了解痤疮丙酸杆菌的耐药情况。4.选取健康雄性家兔(普通级)7 只,采用 Kligman 法造模,将煤焦油外涂于兔耳的双侧耳管开口2cm×2cm处,每日1次,连续2周,于造模第7天时皮下注射痤疮丙酸杆菌菌悬液,浓度为 1.0×108CFU/ml,每侧约 50ul。造模成功后以随机分组方式将14只兔耳分为7组,每组2只,其中6组擦拭中药水提物,第7组1只兔耳擦拭夫西地酸乳膏,另1只擦拭生理盐水进行对照,每日1次,分别于第7天、第14天、第21天观察其疗效及不良反应。结果：1.从80 例痤疮患者皮损处分离培养并鉴定出痤疮丙酸杆菌 27 例,阳性率为33.75%,性别、年龄无统计学差异。2.黄柏、黄芩、大黄的MIC为25 mg/ml；金银花、苦参的MIC为50 mg/ml；连翘的MIC为100 mg/ml；地肤子、白头翁、百花蛇舌草、鱼腥草、马齿苋、旱莲草、紫草、板蓝根、大青叶、蒲公英、车前子、白芷、蛇床子13味中药在最高浓度200 mg/ml进行测试时仍未产生抑菌作用。3.甲硝唑MIC50为16μg/ml,MIC90为128μg/ml,耐药率为78.57%。克林霉素MIC50为4μg/ml, MIC90为16μg/ml,耐药率为 28.57%。阿奇霉素 MIC50 为 2μg/ml,MIC90 为 8μg/ml,耐药率为21.42%。罗红霉素MIC50为 1μg/ml,MIC90为 64μg/ml,耐药率为46.42%。4.兔耳在涂煤焦油7天后,局部增厚,变硬,毛孔变粗大,毛囊口增大并开放隆起,可见白色粉刺及黑色角栓。第14天时可见红色炎性丘疹及少许脓疱。5.经分别擦拭黄柏、黄芩、大黄、金银花、苦参、连翘六种中药水提物治疗7天后的兔耳红肿减轻,部分消退,14天后兔耳厚度变薄,柔软度有所增加,21天后局部毛囊口角栓及丘疹、粉刺减少变平。未见红斑、脱屑等不良反应；外用夫西地酸乳膏治疗后的兔耳红肿消退,而擦拭生理盐水的兔耳与治疗前相比未见明显变化。结论：1.黄柏、黄芩、大黄、金银花、连翘、苦参六种中药水提物对痤疮丙酸杆菌具有良好的体外抑制作用。2.痤疮丙酸杆菌对甲硝唑、克林霉素、罗红霉素、阿奇霉素四种抗生素均有不同程度的耐药,其中甲硝唑耐药率最高。3. 黄柏、黄芩、大黄、金银花、连翘、苦参六种中药水提物对实验兔耳痤疮模型有治疗作用。4.外用黄柏、黄芩、大黄、金银花、连翘、苦参六种中药水提物治疗兔耳痤疮模型未观察到明显的不良反应。

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封面

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中文摘要

英文摘要

前言

技术路线

第一部分 中药水提物对痤疮丙酸杆菌的体外抑制作用

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

第二部分 中药水提物对动物痤疮模型的疗效观察

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

全文小结

参考文献

英文缩略词表

致谢

痤疮丙酸杆菌致病机制的研究进展

攻读硕士学位期间发表的论文

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