PTEN、survivin基因表达与胃癌化疗药物敏感性的相关性研究

摘要

目的：胃癌是消化系统最常见恶性肿瘤，其治疗主要以手术切除为主并辅以术后化疗。但由于不同个体肿瘤细胞对化疗药物的敏感性不同及临床的经验用药等原因使化疗效果并不尽如人意。本实验着重研究原代培养胃癌细胞对化疗药物的敏感性，并进一步探讨其敏感性与胃癌组织中 PTEN (phosphatase and tensin homolog deletedon chromosome tten)及survivin基因表达的关系，为胃癌的临床化疗提供个体化用药的实验资料和依据。 方法：取手术切除的新鲜胃癌组织标本，在无菌条件下去除结缔、脂肪及坏死组织，取大小约 1.5mm<'3>组织块经研磨，过滤制备成活细胞浓度为 (2～3)×10<'5>/ml的单细胞悬液，分别加入10倍血浆峰值药物浓度(PPC)的羟基喜树碱(HCPT)、顺铂(DDP)、阿霉素 (ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、丝裂霉素(MMC) 用 MTT 法检测经上述药物作用后肿瘤细胞活力及代谢活性的变化；同时取胃癌组织制成石蜡切片，用免疫组化检测PTEN、survivin蛋白的表达。 结果：84例胃癌标本经MTF比色法药敏实验成功者80例。经化疗药物作用后，体外培养的胃癌原代培养细胞呈现不同程度形态和代谢活动的变化。MTT结果显示，不同个体的胃癌细胞对化疗药物的敏感性不同，其中 HCPT、MMC 及 5-FU 之间敏感性差异无统计学意义，P值均大于0.05：但HCPT、MMC 及 5-FU 与ADM及CDDP之间敏感性差异具有统计学意义(P<0.05)，前者明显高于后者； ADM 敏感性明显低于CDDP，组间差异具有统计学意义(P<0.01)；在胃癌组织及正常胃粘膜中PTEN蛋白表达阳性率分别为47.5％、100％，两者差异具有有统计学意义(P<0.01)；PTEN蛋白阳性表达与胃癌的 TNM 分期及有无淋巴结转移组间差异具有有统计学意义(P<0.05)，但与组织病理学类型、有无浆膜浸润无关(P>0.05)；在80例胃癌组织中和20例正常胃粘膜中survivin的阳性表达率分别为56/70(70％)和0/20，两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。survivin 的表达与胃癌的组织病理学类型、TNM 分期及有无淋巴结转移组间差异具有有统计学意义(P<0.05)，但与有无浆膜浸润无关(P>0.05)；survivin 阳性表达与 5-FU 及 ADM 耐药有关(P<0.05)；survivin阳性表达与 PTEN 蛋白阳性表达呈负相关关系(r<,s>=-0.678,P<0.01)；羟基喜树碱 (HCPT)、顺铂 (DDP)、阿霉素 (ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)对原代胃癌细胞的杀伤效应与胃癌的组织病理学类型组间差异具有有统计学意义(P<0.05)，结果显示胃癌组织恶性程度越高对化疗药物的敏感性越强；丝裂霉素(MMC)的杀伤效应与胃癌的组织学类型无相关性(P>0.05)，五种化疗药物与胃癌的TNM分期、有无浆膜浸润及有无淋巴结转移均无相关性(P>0.05)。 结论：1、MTT 药敏实验能有效的筛选化疗药物并能发现耐药病例，对临床化疗有较强的预见性和指导性： 2、PTEN 的下调表达及 survivin的上调表达能促进胃癌的淋巴结转移及提高胃癌的TNM 分期； 3、胃癌组织中PTEN的表达与survivin的表达呈负相关关系，提示两者在胃癌的发展中可能具有协同作用，两基因除各自直接作用外还可通过负性调节对方基因的表达而间接发挥功能。 4、胃癌组织中 survivin阳性表达者与5-FU 及 ADM耐药有关，提示survivin可作为胃癌原发性耐药标志之一。

目录

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讨论

结论

附图

参考文献

综述：PIEN与消化道恶性肿瘤关系的研究进展

致谢

硕士期间发表的论文