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霍山石斛快速繁殖及其次生代谢物含量的调控研究

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致谢

第一章 文献综述

第二章 霍山石斛的丛生芽诱导与增殖

1 引言

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果与分析

3.1 直观分析

3.2 方差分析

3.3基本培养基、KT、NAA、6-BA最优水平的选择

3.4霍山石斛丛生芽的大规模快繁

4 讨论

5 总结

第三章 添加物对霍山石斛试管苗的生长及生理特性的影响

1 引言

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 试验结果及其分析

3.1 生物量的变化研究

3.2 叶绿素含量的变化研究

3.3 可溶性糖含量的变化研究

3.4 蛋白质含量的变化研究

3.5 超氧化物歧化酶(SOD)动态变化研究

3.6 过氧化物酶(POD)动态变化研究

3.7 过氧化氢酶(CAT)动态变化研究

3.8 多酚氧化酶(PPO)动态变化研究

4 指标间相关性结果

5 讨论

6 总结

第四章 霍山石斛的生根培养

1 引言

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果与分析

3.1 添加生长素对生根的影响

3.2 添加香蕉泥对生根的影响

4 讨论

5 总结

第五章 霍山石斛多糖含量调控的初步研究

1 引言

2 石斛多糖调控

2.1 材料与方法

2.2 结果与分析

3 石斛多糖对有机自由基DPPH的清除初步研究

3.1 材料与方法

3.2 结果与分析

4 讨论

5 总结

第六章 霍山石斛石斛碱和联苄类物质的研究

1 引言

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果与分析

3.1 石斛碱和Moscatilin的TLC图结果与分析

3.2 Moscatilin含量测定的波长选择

3.3 联苄类成分Moscatilin的含量的结果与分析

3.4 11种样品的色谱峰比较结果

4 讨论

5 总结

展望、创新之处、不足之处

参考文献

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摘要

本文对霍山石斛的离体快繁进行系统的研究,并且对霍山石斛次生代谢物调控进行分析研究,结果如下: 1、选取MS、6-BA、KT、NAA这四个因子,每个因子3个水平,通过正交设计试验对霍山石斛丛生芽的诱导进行研究,研究结果发现:这4个因子对霍山石斛丛生芽诱导的影响顺序依次为:KT>基本培养基>6.BA>NAA,其中,KT对霍山石斛丛生芽的诱导极为显著,而基本培养基、NAA、6-BA对霍山石斛丛生芽的诱导不显著。并从中筛选出诱导霍山石斛丛生芽的最优培养基为:1/2MS+0.2mg/LKT+0.2mg/LNAA+0.3mg/L6-BA。 2、以1/2MS+0.2mg/LKT+0.2mg/LNAA+0.3mg/L6-BA为基本培养基作为对照,通过附加浓度100g/L、200g/L、300g/L的土豆泥、香蕉泥、白萝卜汁和10mg/L、20mg/L、40mg/L的硝酸镧进行培养。研究结果发现:不同添加物对霍山石斛生长均具有一定的促进作用,其中土豆泥和硝酸镧的促进作用具有显著差异性。同时,对各生理指标进行相关分析发现,可以把叶绿素含量作为霍山石斛优质苗木早期选择的一个重要生理指标。 3、以MS为基本培养基作为对照,通过添加浓度为0.4mg/L、0.8mg/L、1.6mg/L的IBA,浓度为0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L的NAA以及质量分数为10%、20%、40%的香蕉泥进行生根培养,发现:添加20%的香蕉泥诱导霍山石斛试管苗生根效果最好。 4、以1/2MS+0.2mg/LKT+0.2mg/LNAA+0.3mg/L6-BA为基本培养基作为对照,添加浓度为0.5mg/L、2.5mg/L、12.5mg/L的L-赖氨酸、0.2mg/L、1.0mg/L、5.0mg/L的水杨酸以及10mg/L、20mg/L、40mg/L的硝酸镧进行石斛多糖的调控研究,发现:20mg/L的硝酸镧和2.5mg/L的L-赖氨酸在各自浓度范围内促进石斛多糖含量的提升效果最好,且具有极显著差异性:水杨酸则具有显著差异性。同时,对石斛多糖清除有机自由基DPPH的能力进行初步研究,发现石斛多糖具有清除有机自有基的能力。 5、以1/2MS+0.2mg/LKT+0.2mg/LNAA+0.3mg/L6-BA为基本培养基作为对照,添加浓度为0.5mg/L、2.5mg/L、12.5mg/L的L-赖氨酸、0.2mg/L、1.0mg/L、5.0mg/L的水杨酸以及10mg/L、20mg/L、40mg/L的硝酸镧进行石斛碱和联苄类物质Moscatilin的调控研究,利用HPLC/UV法对其进行含量测定,发现:L-赖氨酸和水杨酸对Moscatilin的含量均有一定的促进作用,且12.5mg/L的L-赖氨酸和0.5mg/L的水杨酸在各自浓度范围的影响提升效果最好。

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