环孢霉素A诱导NIT-1胰岛β细胞基因的差异表达及有关分子机制

摘要

环孢酶素A(cyclosporin A,CsA)是一种强效的免疫抑制剂,广泛地应用于器官、细胞移植后排斥反应的防治以及自身性免疫疾病的治疗.但是,不少临床观察显示CsA有影响胰岛β细胞功能、破坏糖耐量甚至导致糖尿病的副作用.研究分析CsA对胰岛功能的影响及其作用机制,对于指导临床合理用药及防治CsA的副作用具有较重要的现实意义.目的:通过体外实验,观察CsA对NIT-1胰岛β细胞胰岛素释放的影响;同时,应用DNA芯片技术检测CsA作用于NIT-1细胞不同时间的基因差异表达,并结合生物信息学方法从基因水平上探讨CsA对胰岛素分泌影响的作用机制.结论:CsA可抑制NIT-1胰岛β细胞胰岛素的释放,其抑制作用可能与抑制细胞氧化磷酸化、胰岛素胞吐分泌等代谢-分泌偶联过程中有关功能性酶类或蛋白质mRNA的表达有关.

目录

缩略词及中英文对照

前 言

第一部分 CsA对NIT-1胰岛β细胞胰岛素分泌的影响

一 材料和方法

二 结 果

三 讨论

小结

第二部分应用DNA芯片检测CsA作用于NIT-1细胞的基因差异表达

一、DNA芯片对NIT-1细胞差异表达基因的检测

二、以RT-PCR法对部分芯片差异表达基因的检测

三、讨论

小结

第三部分差异表达基因的比较分析、功能聚类分析和筛选

一、差异表达基因的大体功能分类

二、不同作用时间点差异表达基因的比较分析

三、极具意义差异表达基因的文献轮廓聚类分析

四、与CsA作用于NIT-1细胞有关机制密切相关的基因的筛选

五、讨论

小结

结论

参考文献

致 谢

综述 基因表达芯片在胰岛β细胞分子生物学研究中的应用

附表1-6