放射性核素标记多肽K237在肺癌分子显像和靶向治疗中的实验研究

摘要

[目的] 1.探讨99Tcm标记多肽K237的方法，研究99Tcm-K237在健康小鼠体内的生物分布特性及其在荷瘤小鼠体内的显像表现； 2.观察131I标记多肽K237(131I-K237)对荷人肺癌裸鼠移植瘤的靶向治疗作用。 [方法] 1.采用99Tcm直接法标记多肽K237。探索不同标记条件下产物的标记率、放化纯和体外稳定性。采用MTT法检测99Tcm-K237的生物学活性，竞争结合实验观察99Tcm-K237对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的亲合作用。正常小鼠尾静脉注射99Tcm-K237(2.96MBq，0.1ml)后30min和1、2、4、8及24h后处死，取血液及主要脏器，称重并测量放射性，测定其每克组织百分注射剂量率(％ID/g)。将99Tcm-K237(5.55MBq，0.1ml)经荷人肺癌A549裸鼠尾静脉注射，于注射后1、2、3、5及8h行SPECT显像，利用感兴趣区技术(ROI)对肿瘤/对侧相应部位肌肉组织放射性比值(T/NT)进行半定量分析。 2.采用Iodogen法标记K237，MTT法检测131I-K237生物活性，竞争结合实验观察131I-K237对HUVEC的亲合作用，并进行荷瘤裸鼠体内的生物分布研究。建立表达血管内皮生长因子受体-2(KDR)的荷人肺癌裸鼠模型；25只荷瘤鼠模型分为5组，每组5只，分别为生理盐水对照组、131I-K237静脉注射组、131I-K237瘤体内注射组、K237组和131I组。注射相应试剂后31d，比较肿瘤的体积，计算抑瘤率，并通过生物化学、免疫组织化学及病理组织学等方法检测131I-K237对肿瘤生长的抑制作用及其对正常组织器官的放射毒副作用。 [结果] 1.SnCl2·2H2O的用量为100μgK237用量为100μg、pH值6.0、反应时间10～30min和反应温度4～37℃时，99Tcm-K237的标记率和放化纯均>95％，且具有抑制HUVEC增殖的活性，与未标记的K237之间差异无统计学意义(t=2.83，P>0.05)。99Tcm-K237在生理盐水和正常人血清中放置24h后，其放化纯分别为(89.1±1.4)％和(88.3±1.1)％，二者差异无统计学意义(t=1.56，P>0.05)。静脉注射99Tcm-K237后24h内，小鼠血液放射性清除迅速，通过肾脏排泄较快，放射性主要聚集在肾脏，其它组织器官的放射性随时间逐渐降低。99Tcm-K237荷人肺癌A549裸鼠显像示肿瘤组织摄取高，T/NT在1、2、3、5和8h分别为1.25±0.11、3.13±0.26、3.97±0.31、1.34±0.29、1.18±0.25； 2.131I-K237的标记率为60.16％，放化纯大于95％，且具有抑制HUVEC增殖的活性，与未标记的K237之间差异无统计学意义(t=1.67，P>0.05)。30min、1h、2h、4h、8h、12h和24h的T/NT分别为2.12、2.32、2.51、2.70、3.03、4.31和4.19。治疗结束时，131I-K237静脉和瘤体内注射组、K237组及131I组的抑瘤率分别为75.01％、78.99％、31.15％、12.61％。131I-K237静脉和瘤体内注射组肿瘤平均体积较小，与生理盐水对照组、K237组和131I组比较，差异有统计学意义(P<0.01)。光学显微镜和电镜显示131I-K237治疗组和K237组肿瘤细胞发生明显坏死；未发现肝、肾、脾和造血组织的辐射损伤。 [结论] 1.99Tcm-K237易于制备，标记率高，体内外稳定性好，具有较理想且符合实际的动物体内动力学表现，可望成为一种新的肿瘤血管生成显像剂； 2.131I-K237对荷人肺癌裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用，未发现明显的毒副作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文缩写词汇表

声明

前 言

第一部分99Tcm-K237的制备及其小鼠体内分布与显像研究

引 言

材料与方法

结 果

讨论

第二部分 131I标记K237靶向治疗荷人肺癌裸鼠的实验研究

引 言

材料和方法

结 果

讨 论

结论

参考文献

综述：以血管内皮生长因子及其受体为靶向的肺癌放射性核素显像

攻读学位期间公开发表的论文

致谢